论文部分内容阅读
目的：种子细胞是组织工程研究的一个重要组成部分，种子细胞的获得非常重要，成肌细胞可以从骨骼肌培养、纯化而来，也可以诱导骨髓间充质干细胞而获得。本实验通过比较两种不同组织来源培养的骨骼肌成肌细胞的存活率，希望为组织工程化骨骼肌种子细胞的选择提供参考依据，为种子细胞的培养提供一种更优化的方法。 方法：采用胰蛋白酶消化法对出生1天内的SD雄性大鼠乳鼠成肌细胞的体外原代培养、纯化，传代与鉴定，取第3代成肌细胞，常规制成细胞悬液，以1×10~5／ml的细胞密度接种到24孔板和96孔板。每1，3，5，7，9d分别从24孔板中随机取出5个孔和从96孔板中随机取出10个孔的细胞，将取出的5孔细胞置于细胞活力分析仪进行细胞存活率的测定。同时将10孔的细胞行MTT法检测细胞生长活力，测1，3，5，7，9d的OD值。用细胞存活率的平均值和OD值绘制细胞生长曲线，了解细胞生长情况。 体外原代培养4周龄SD雄性大鼠的骨髓间充质干细胞(MSCs)，当传至第2代时，以含5-Aza10μmol／L的诱导培养基行诱导培养。诱导14天后，取传代至第3代的成肌细胞，常规制成细胞悬液，以1×10~5／ml的细