【摘 要】
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目的:体外建立人肉瘤MS5细胞系长春新碱耐药细胞株,观察其生物学特性和体内的成瘤能力。方法:本论文采用低浓度加量持续诱导法建立人肉瘤MS5细胞的耐长春新碱模型,将其命名为
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目的:体外建立人肉瘤MS5细胞系长春新碱耐药细胞株,观察其生物学特性和体内的成瘤能力。方法:本论文采用低浓度加量持续诱导法建立人肉瘤MS5细胞的耐长春新碱模型,将其命名为MS5/VCR。光镜下观察细胞的形态,体外药物敏感实验比较两株细胞对化疗药物的敏感性,将MS5和MS5/VCR细胞皮下接种8只裸鼠,55天后杀死裸鼠观察肿瘤形成肿瘤的大小,免疫组织化学法观察移植瘤mdr-1表达。结果:肉瘤细胞MS5经VCR诱导7个月后,获得肉瘤长春新碱耐药细胞株MS5/VCR,MS5/VCR在长春新碱浓度为6μg/ml的培养基中稳定生长,与MS5细胞相比,耐药细胞株形态稍圆。体外药物敏感实验结果显示MS5/VCR细胞株对VCR有一定的耐药性,肿瘤种植实验显示MS5/VCR细胞比MS5细胞有较强致瘤性,免疫组化结果显示mdr-1在MS5和MS5/VCR移植瘤均有表达。结论:1、体外浓度梯度递增法可诱导建立人肉瘤MS5长春新碱耐药细胞株MS5/VCR。2、人肉瘤MS5长春新碱耐药细胞株MS5/VCR体外克隆和体内成瘤能力强于其亲本细胞MS5,可能含有较多的肿瘤干细胞。目的:本实验应用血液学和DNA分析的方法对3例异常血红蛋白Hb G-Chinese进行鉴定。方法:醋酸纤维膜电泳的方法发现了异常血红蛋白。应用聚合酶链反应、限制性内切酶酶切和DNA序列测定来确定存在Hb G-Chinese基因突变。结果:确定了3例Hb G-Chinese携带者。结论:PCR是确定基因突变导致血红蛋白变异的一种简单、快捷、又便宜的方法,Hb G-Chinese携带者α- globin-2 G到C的替代产生一个pstⅠ酶切位点。
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