寒邪及相关因素犯肺的定量模拟研究

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目的:本研究是在临床研究结果的基础上,进一步在实验室模拟相关气象因子,通过分析不同程度的寒邪及不同的刺激时间对小鼠肺脏的影响及对寒邪引发的肺系病进行临床观察,从病理、细胞因子及基因表达等角度探讨寒邪及相关因素与肺系病致病程度的量化关系,深化了肺系病致病因子定量理论,有利于促进医学的量化、标准化、科学化。同时,本课题兼顾了风湿之邪,通过分析风邪、湿邪对寒邪致病产生的作用,从而为防治和研究呼吸系统疾病提供一定的指导。方法:实验开始前将全部实验动物置于无风、温度(20±2)℃、湿度50%~55%的环境中进行适应性饲养,持续1周,饮食饮水自由。第一阶段:空白组(N):将小鼠置于无风、温度(20±2)℃、湿度50%~55%的环境中饲养,4d后取材。实验分组:T1组:将小鼠置于控温冰箱中,保持温度10℃,湿度50%~55%的环境中刺激2小时。T2组:将小鼠置于控温冰箱中,保持温度0℃,湿度50%~55%的环境中刺激2小时。T3组:将小鼠置于控温冰箱中,保持温度-10℃,湿度50%~55%的环境中刺激2小时。T4组:将小鼠置于控温冰箱中,保持温度0℃,湿度50%~55%的环境中刺激4小时。其中T1组刺激完毕立即取材,T2、T3、T4组连续刺激4天后取材。第二阶段:风寒组:将小鼠置于平均风速3m/s,温度0℃,湿度50%~55%的环境中刺激2小时。寒湿组:将小鼠置于无风,温度0℃,湿度85%的环境中刺激2小时。风寒湿组:将小鼠置于平均风速3m/s,温度0℃,湿度85%的环境中刺激2小时。3组小鼠均连续刺激4天后取材。光镜下观察气道病理改变并做相应的病理评分,ELISA法检测肺组织匀浆中TNF-α、IL-1β、SOD、MDA的含量,RT-PCR法检测小鼠HSP70mRNA表达水平的变化。应用SPSS18.0软件进行统计学处理实验数据,对比各组小鼠指标差异,探讨风邪及相关因素犯肺与肺脏病变程度之间量的相关性。结果:由统计结果可发现,各实验组小鼠肺组织标本匀浆中TNF-α、IL-1β、SOD、MDA及HSP70mRNA的含量与对照组相比较均出现明显升高(P<0.01)。比较相同程度的寒邪而刺激时间不同的两个实验组,温度控制在0℃时,T4组小鼠肺组织匀浆中的TNF-α、IL-1β、SOD、MDA及HSP70mRNA含量较T2组有所升高(P<0.01);比较相同刺激时间而寒邪程度不同的实验组,当小鼠受刺激时间为2小时时,T3组小鼠肺组织匀浆中的TNF-α、IL-1β、SOD、MDA及HSP70mRNA含量较T2组有所升高(P<0.01)。结论:寒邪会引起肺脏病理改变和细胞因子水平含量的增加,且随着寒邪程度的增加及刺激时间的增长,肺脏损伤越严重。当寒邪犯肺的时间较短暂时,寒邪程度的差异对肺脏损伤的影响较小。寒邪、风寒邪、风寒湿邪对肺脏均有不同程度的损害,且寒邪、寒湿邪在一定程度上能明显加重风邪对机体肺脏的损害,风寒湿邪对肺脏的损害最为严重。
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