利用杆状病毒表达系统表达SARS-CoV和流感病毒的蛋白

来源 :中国科学院武汉病毒研究所 | 被引量 : 2次 | 上传用户:babygnus
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本论文,应用杆状病毒表达系统对SARS冠状病毒(SARS-CoV)和流感病毒的蛋白进行了高效表达。   第一章:介绍了各类表达系统,特别是杆状病毒表达系统,并对SARS-CoV和流感病毒进行了介绍。   第二章:利用AcMNPV Bac-to-Bac表达系统和一种带有信号肽基因和6个组氨酸(6×His)标签的转移载体pFastBacSHTa,表达了SARS-CoV WH20株的S,S1,S2,N,3a,M,7a,E共8个结构蛋白,得到了能够高效表达8个结构蛋白的重组病毒,Western blot分析表明所表达的蛋白具有良好的抗原性。纯化所表达的E蛋白制备了相应的多克隆抗体。   第三章:同样利用AcMNPV Bac-to-Bac表达系统和转移载体pFastBacSHTa表达了关于流感病毒的结构蛋白HA、NA、NP几个不同株来源的共计10种蛋白(分别记为X1、X2、X3、X4、H5、H7、H9、T1、I2、T3)。   第四章:介绍了AcMNPV表面展示系统的研究,通过在AcMNPV囊膜蛋白GP64的信号肽和成熟蛋白之间插入增强型绿色荧光蛋白(eGFP)和SARS-CoV WH20株的膜结构糖蛋白S,使它们与gp64融合表达,蛋白印迹反应表明可以检测到融合蛋白。
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