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第一部分 IL-2调控Th17/Treg细胞平衡在Graves病发病机制中的作用 目的：探讨IL-2调控Th17/Treg细胞平衡在Graves病发病机制中的作用。 方法：本研究招募30名GD初诊病人（GD组），30名GD缓解期病人（eGD组）及28名正常人（NC组）。化学免疫发光法检测甲状腺功能（FT3、FT4、TSH）和自身抗体（TRAb、TPOAb、TgAb）。提取外周血单个核细胞（PBMC），分别采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测RORγt、Foxp3、IL-2 mRNA的表达，ELISA检测血浆中IL-2、IL-17、IL-10蛋白的表达。 结果：1、GD组的甲状腺功能显著高于eGD及NC组（P＜0.05）。TRAb、TgAb的水平在GD组显著高于eGD及NC组，且TRAb、TgAb的水平在eGD组中较NC组明显升高（P＜0.05）。GD组及eGD组的TPOAb水平显著高于NC组（P＜0.05），但TPOAb水平在GD组和eGD组之间无统计学差异（P＞0.05）。2、与 NC组相比，GD组中 IL-2的mRNA和蛋白、Foxp3 mRNA和IL-10蛋白的表达水平均减少，而RORγt mRNA和 IL-17蛋白的表达水平均增加，以上结果均有统计学差异（P＜0.05）。3、GD组中，IL-2 mRNA与IL-17蛋白之间的表达水平正相关（P＜0.05），IL-2 mRNA分别与RORγt mRNA、Foxp3 mRNA、IL-10蛋白之间的表达水平均不相关(P＞0.05)， IL-2蛋白分别与 RORγt mRNA、IL-17蛋白、Foxp3 mRNA、IL-10蛋白之间的表达水平均不相关(P＞0.05)。 结论：IL-2的表达减少，导致Th17细胞分化增多，同时Treg细胞分化降低，不能有效调控Th17/Treg细胞平衡，促进GD的发生。 第二部分 TRAF-6在Graves病中的免疫耐受作用，及其具体作用机制的探究 目的：探讨TRAF-6是否通过抑制TGF-β1介导的Smad2/3磷酸化，调控Th17/Treg细胞平衡，从而在GD的发生中发挥免疫耐受的作用。 方法：本研究招募30名GD初诊病人（GD组），30名GD缓解期病人（eGD组）及28名正常人（NC组）。提取PBMC，分别采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测TRAF-6 mRNA的表达，Western blot检测p-Smad2、p-Smad3、TRAF-6蛋白的表达。ELISA检测血浆中TGF-β1蛋白的表达。 结果：1、与NC组相比，GD组中TGF-β1蛋白的表达水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；GD组中p-Smad2和p-Smad3的蛋白表达较NC组有上升趋势（P＞0.05）。2、GD组中的TRAF-6 mRNA与NC组比较表达降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；TRAF-6蛋白表达较NC组有下降趋势（P＞0.05），3、GD组中，TRAF-6 mRNA分别与p-Smad2蛋白、p-Smad3蛋白之间的表达水平不相关（P＞0.05），TRAF-6蛋白与p-Smad2蛋白之间表达水平正相关（P＜0.05），TRAF-6蛋白与p-Smad3蛋白之间的表达水平不相关（P＞0.05）；GD组中p-Smad2蛋白与IL-2 mRNA之间的表达水平负相关（P＜0.05），p-Smad2蛋白与IL-2蛋白之间的表达水平不相关（P＞0.05）；GD组中p-Smad3蛋白分别与IL-2 mRNA、IL-2蛋白之间的表达水平不相关（P＞0.05）。 结论：TRAF-6在 GD的发生发展过程中发挥免疫耐受的作用；TRAF-6的低表达，不足以抑制TGF-β1介导Smad2/3的磷酸化，导致增多的磷酸化Smad2/3下调IL-2表达，进而诱导Th17细胞的分化，同时抑制Treg细胞的分化，使得机体不能维持免疫耐受，促进GD的发生。