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目的:本研究旨在探讨软骨细胞体外培养的方法，并从细胞分子及基因表达水平研究中药膝痹康治疗骨性关节炎的作用机理，为提高膝痹康的疗效提供理论依据，为中医药治疗OA的深入研究进行方法学的探索。
方法:
1.取材幼龄兔膝关节软骨，通过联合酶消化法体外分离培养软骨细胞，并由甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞；
2.采用MTS比色法、考马斯亮蓝染色法观察不同浓度的膝痹康对正常软骨细胞增殖及总蛋白含量的影响；
3.采用ELISA、RT-PCR法观察膝痹康对IL-1诱导的软骨细胞中MMP-3的影响；
4.采用RT-PCR法观察膝痹康对IL-1诱导的软骨细胞中II型胶原、蛋白多糖核心蛋白表达的影响。
结果:
1.通过联合酶消化法成功地分离培养出兔软骨细胞，并根据软骨细胞的表型鉴定，认为三代以内的软骨细胞活性较高，保持软骨细胞的表型，是实验研究的理想细胞。
2.经膝痹康含药学清干预后，通过MTS法检测发现，在干预3天、5天、7天后，5％、10％、20％浓度的含药血清均对软骨细胞的增殖有一定的促进作用，并具有统计学差异。其中以中等浓度作用较强。对于总蛋白的影响:5％、10％、20％浓度的含药血清对软骨细胞总蛋白的合成有明显的促进作用，其中以中等浓度作用较强。
3.本实验结果发现:IL-1可以损伤软骨细胞，增加细胞分泌MMP-3的蛋白含量以及促进软骨细胞中MMP-3mRNA的表达。而经膝痹康含药血清干预后发现，5％，10％.20aYo的含药血清浓度都可以减缓MMP-3的分泌以及MMP-3mRNA的表达，其中以低、中浓度的含药血清效果较明显。
4.IL-1可以损伤软骨细胞而减缓软骨细胞中II型胶原和蛋白多糖核心蛋白mRNA的表达。在膝痹康含药血清干预后发现，5％，10％，20％的含药血清浓度均可促进II型胶原mRNA和蛋白多糖核心蛋白mRNA的表达，其中以中浓度效果较明显。
结论:
1.通过联合酶消化法成功分离培养出兔软骨细胞，为药物干预软骨细胞的实验研究创造了条件。
2.中药膝痹康可以促进体外培养软骨细胞的增殖，并可以加速软骨细胞分泌总蛋白的量。
3.IL-1可以损伤体外培养的软骨细胞，使软骨细胞过多分泌MMP-3，并促进软骨细胞高表达MMP-3mRNA，低表达II型胶原mRNA及蛋白多糖核心蛋白mRNA。
4.中药膝痹康可抑制IL-1损伤软骨细胞，可能是通过抑制MMP-3的分泌和MMP-3mRNA的表达，及促进II型胶原mRNA和蛋白多糖核心蛋白mRNA的表达来实现。
5.本实验初步探讨膝痹康作为IL-1抑制剂的作用机理，其为临床膝痹康延缓关节软骨退化的作用机制提供了实验依据。