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为验证海洋破囊壶菌△4-脱饱和酶cDNA序列的基因功能，构建重组表达质粒，并以酿酒酵母作为宿主进行功能表达分析，添加外源脂肪酸C22:5底物，半乳糖诱导表达后，阳性克隆子总脂肪酸中出现了二十二碳六烯酸C22:6(占酵母总脂肪酸含量的41.13％)，A4-脱饱和酶基因(FAD4)在酿酒酵母中得到了表达。
利用重叠延伸PCR技术扩增△5-延长酶基因(EL05)和FAD4的融合基因EL05-FAD4，测序验证后构建重组表达质粒，转化酿酒酵母并添加外源脂肪酸C20:5底物，半乳糖诱导表达。与对照菌相比，阳性克隆子总脂肪酸中出现了与二十二碳六烯酸C22:6甲酯标准品相对应的新峰，从而获得更经济的DHA工程菌株。
为进一步了解FAD4转录调控的分子机制，通过LA-PCR方法，从破囊壶菌基因组DNA中扩增得到约1000bp的FAD4 5’端侧翼区域的单一产物，并进行序列测定及提交GenBank数据库(GenBank accession No.EU074209)。经启动子软件与序列比对分析，该序列分别有类似于TATA盒、CAAT盒、GC盒等元件，这些元件均是真核启动子序列的基本结构特征。
对FAD4 5’端侧翼区域进行片段缺失扩增，得到系列亚克隆片段，连接到以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的pGIow-TOPO质粒中，构建了系列重组表达质粒，并成功转化大肠杆菌Ecoli ToPl0。荧光显微观察表明阳性转化子均发出绿色荧光，它们启动绿色荧光蛋白表达的功能得到确认。