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目的槲皮素是一种广泛应用于传统中药的植物类黄酮,被证实具有抗炎、抑癌、神经保护及心肌保护等作用,在动物实验中也被证实能够抑制卵巢摘除引起的骨量丢失,但目前槲皮素骨保护的分子机制尚不清楚。本研究旨在分析中药单体槲皮素对小鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响,并进一步探讨其分子机制。材料及方法自赛业生物公司购买已鉴定的C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,使用完全培养基复苏、培养。1.使用含不同浓度槲皮素的完全培养基培养细胞6天,使用CCK-8法检测不同时间不同浓度作用下细胞活性;2.使用完全培养基及含不同浓度槲皮素、雌激素的成骨诱导培养基培养细胞7天或21天,ALP试剂盒检测细胞ALP活性,茜素红S染色(ARS)观察细胞外基质形成及矿化;3.使用含不同浓度槲皮素的成骨诱导培养基培养细胞7天,定量实时PCR(QPCR)检测Osterix(OSX)、runt相关转录因子2(RUNX 2)和骨桥蛋白(OPN)的表达;4.使用雌激素受体拮抗剂阻断雌激素信号通路,QPCR检测槲皮素处理后OSX、RUNX 2和OPN的表达;5.使用雌激素受体拮抗剂阻断雌激素信号通路,检测槲皮素处理后骨形态发生蛋白2(BMP2)、Smad1、Smad4、OSX、RUNX2、OPN表达水平及Smad1磷酸化水平。结果1.对照组及实验组的细胞光密度值(ODs)在前5天增加,在第6天下降;在第1天,0.1μM及1μM组ODs显著高于对照组,在2-4天,实验组ODs均高于对照组;2.2.5μM槲皮素及雌激素可显著增加细胞ALP活性及矿化结节的形成;3.2.5μM槲皮素显著增加OSX、RUNX 2和OPN的表达;4.使用雌激素受体拮抗剂后,显著抑制槲皮素及雌激素对OSX、RUNX 2和OPN表达的促进作用;5.使用雌激素受体拮抗剂后,显著抑制槲皮素对BMP2、Smad1、Smad4、OSX、RUNX2、OPN表达水平及Smad1磷酸化的促进作用。结论1.槲皮素具有促进骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的效应;2.通过雌激素受体激活BMP/smad信号通路是槲皮素发挥药理作用的可能机制之一。