A群奈瑟氏脑膜炎球菌多糖的提取及结合工艺的探索

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奈瑟氏脑膜炎菌是流脑的致病菌,由Weichselbaum于1887年第一次从病人的脑脊液中分离出来,并报告。在全球范围内,脑膜炎球菌感染是导致人们患病和死亡的一个重要原因。奈瑟氏脑膜炎球菌是一种需氧的革兰氏阴性球菌,由于脑膜炎球菌经常成对排列,因此又被称为“脑膜炎双球菌”。细菌的荚膜在病菌致病力方面起着重要的作用,无荚膜的菌株很少引起临床型感染。但是脑膜炎球菌多糖疫苗对18月龄以下婴幼儿免疫效果差。如将荚膜多糖(CPs)偶联到一种载体蛋白(胸腺依赖性抗原,TD-Ag)上,则CPs在人体内就可产生T细胞依赖性抗体应答,可有效保护上述高危人群。   A群脑膜炎球菌经三代扩增培养后接种于75L生物反应器中培养,然后经甲醛杀菌,离心获得上清液,用cetavlon沉淀法提取A菌群的荚膜多糖。A群脑膜炎球菌荚膜多糖用溴化氰(CNBr)活化后与己二酰肼(ADH)形成多糖—酰肼基衍生物(CPS-AH),然后在催化剂碳二亚胺(EDAC)作用下将CPs与破伤风类毒素(TT)进行共价结合。结合液经透析,凝胶过滤纯化,0.22μm膜除菌过滤得到A群脑膜炎球菌多糖结合物原液,然后进行各项质量检测。证明该工艺具有较好的可行性,为A群单价和A+C群两价脑膜炎球菌多糖结合疫苗的研制提供了试验基础。
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