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背景胡椒碱是中药黑胡椒、荜茇等主要的单体成分,印度古方中曾有口服黑胡椒并配合其它药物治疗白癜风的记载,我院选取女贞子、黑胡椒、透骨草、浮萍、乌蕨组成非光敏组方中药2号,其中黑胡椒、女贞子为君药,临床外用治疗白癜风取得较好疗效。国外研究发现黑胡椒提取物以及其单体成分胡椒碱可促进黑素瘤细胞的增殖和黑素量的合成,刺激黑素细胞的增殖和分化。国内研究表明胡椒碱可以显著促进黑素瘤细胞黑素的合成,在试验浓度可直接上调蘑菇酪氨酸酶的活性;并可通过上调酪氨酸酶和TRP1的表达明显促进表皮黑素细胞的黑素合成。最近有学者应用无色小鼠模型探讨胡椒碱及其类似合成物在白癜风治疗中的作用,研究显示,胡椒碱及其类似合成物可以刺激小鼠均匀复色。局部外涂小鼠皮肤并联合小剂量的UVR照射,能显著提高色素沉着反应,美容效果较常规治疗方法好。由此可见胡椒碱可影响黑素细胞的生物学活性,并作为一种治疗白癜风的新的药物有较好的应用前景。目前胡椒碱治疗白癜风的机理尚不明确,且对表皮黑素细胞迁移影响的研究未见报道,为进一步探讨其可能的作用机理,我们研究中药单体胡椒碱对人表皮黑素细胞生长及迁移的影响,为临床研发安全有效的治疗白癜风的新药提供实验依据。目的研究中药单体胡椒碱对表皮黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性、黑素合成及黑素细胞迁移的影响。方法培养人表皮黑素细胞以系列浓度的胡椒碱作用72小时,并以相应的溶媒作为对照,采用MTT法测定细胞增殖情况,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解法测定黑素含量。6.25ug/ml胡椒碱作用48小时后,应用细胞划线法和微孔滤膜分析法分析中药单体胡椒碱对人表皮黑素细胞迁移的作用。结果胡椒碱在3.125ug/ml时,对黑素细胞增殖无明显影响,与空白对照组相比无显著性差异;浓度在6..5-12.5ug/ml时,能促进黑素细胞的增殖(P＜0.05),以6.25ug/ml作用最为显著(P＜0.01)。浓度增加至25ug/ml时对黑素细胞增殖无明显影响;当浓度提高至50ug/ml以上时对黑素细胞生长有明显影响(P＜0.01),细胞生长不理想,胞体变大,折光性减弱,并于48小时内逐渐脱壁死去。在不同的时间点用6.25ug/ml的胡椒碱处理黑素细胞,研究发现处理24小时、48小时对黑素细胞增殖无明显作用。处理72小时能明显促进黑素细胞增殖,与对照组相比,有显著性差异(P＜0.05)。浓度3.125～12.5ug/ml时,胡椒碱对黑素细胞酪氨酸酶活性无影响,而增加至25ug/ml和50ug/ml时,酪氨酸酶活性明显增加,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01)。胡椒碱在浓度3.125～50ug/ml对黑素合成有明显的促进作用,且以12.5ug/ml作用最为显著,各浓度组与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。在迁移实验中,为了排除细胞增殖的干扰,选择胡椒碱的作用浓度和作用时间分别为6.25ug/ml和48 h。研究表明中药单体胡椒碱对人表皮黑素细胞无促迁移作用(P≥0.05)。结论中药单体胡椒碱可促进表皮黑素细胞的增殖,明显促进表皮黑素细胞的黑素合成及酪氨酸酶活性,而对黑素细胞迁移无明显刺激作用。