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黄体的主要功能是分泌孕酮以支持妊娠,了解黄体功能的调控将有利于提高人类和其它物种的繁殖效率以及发展有效的避孕技术。本文一方面概述了黄体相关领域的研究进展;另一方面,以猪黄体为材料,在黄体获得溶解能力前后,研究了前列腺素F2a(PGF2α)对参与细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解的酶类的影响,并用有序差异显示(ordered differential display, ODD)方法对获得溶解能力前后的黄体以及PGF2α作用后的黄体进行基因表达差异的分析。主要结果如下:
1.发情后9天(没有溶解能力)或17天(有溶解能力)的黄体用生理盐水或cloprostenol(一种PGF2α类似物)处理,30分钟或10小时后收集黄体。结果显示:只有17天黄体,PGF2α作用10小时才能提高MMP-3,MMP-9,MMP-13,MMP-14,ADAMTS-1和TIMP-3的mRNA表达,而9天黄体则没有类似发应;在9天和17天黄体,PGF2α作用10小时都能提高MMP-1的mRNA表达,但17天黄体MMP-1表达高于9天黄体。
2.用epostane(EPO,3pHSD的抑制剂)抑制9天黄体的孕酮合成。结果显示PGF2α和EPO同时作用后MMP-1的mRNA表达类似17天黄体在PGF2α作用10小时的反应,表明MMP-1的mRNA表达受到高浓度孕酮的抑制,也表明除了孕酮的保护作用外,还存在其它的作用机制使PGF2α不能诱导9天黄体表达其它MMPs。
3.采用有序差异显示(ordered differential display, ODD)方法,检测生理盐水或PGF2α作用10小时的9天和17天黄体中差异表达的基因。初步的结果表明GSTA2可能与黄体是否具有溶解能力有密切关系。
因此,猪黄体获得溶解能力的过程伴随着PGF2α对MMP-1,MMP-3,MMP-9,MMP-13,MMP-14,ADAMTS-1,TIMP-3等基因表达的差异调控。PGF2α只能在有溶解能力的黄体中诱导这些基因的表达,从而导致黄体中ECM降解和细胞凋亡,这些基因的表达可能在黄体溶解过程中发挥重要作用。另外在没有溶解能力的黄体中,除了孕酮的保护作用外,还存在其它的作用机制使PGF2α不能诱导黄体发生溶解。本研究结果增进了对黄体获得溶解能力这一过程的认识。