慢性髓细胞白血病细胞分泌的exosome的抗白血病作用研究

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慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是一种起源于多能造血干细胞的恶性增生性疾病,目前尚无理想的根治手段。大量的临床及实验室证据表明,CML细胞具有免疫原性,能够成为抗白血病细胞免疫治疗的靶点。采用过继性免疫治疗,输注抗白血病特异性细胞毒性T细胞,可以清除这些患者的残留病灶。近年来,肿瘤细胞分泌的小囊泡exosome在肿瘤模型中发挥的免疫刺激功能引起了人们的广泛关注。Exosome表达抗原呈递相关分子,带有相关的肿瘤抗原信息,具有抗原提呈能力,使其有可能成为免疫治疗中诱人的载体。 第一部分实验,采用离心超滤和蔗糖密度梯度离心等方法分离出5例慢性髓细胞白血病慢性期患者CML细胞和K562细胞释放的exosome,经透射电镜观察其超微结构。采用固相免疫电镜法(solid phase immunoelectron microscopic method,SPIEM)制备CML-exosome的HSP70,ICAM-1及ABL免疫电镜标本。采用Western blot方法检测CML-exosome是否表达HSP70及MHC-Ⅰ。结果显示:CML细胞及K562细胞分泌的exosome为直径50~100nm的膜性微囊,圆形或椭圆形,腔内为低电子密度成分。CML-exosome经抗HSP70、ICAM-1和ABL抗体-胶体金免疫电镜标记,囊外膜及腔内可见点状、颗粒状电子致密物沉积。
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