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背景Sestrin2(Sesn2)是sestrin家族的重要成员,它是一组高度保守的蛋白质,起初是作为抗氧化体系的重要成员被发现,在机体受到应激包括遗传物质损伤、氧化应激和缺氧等均可以诱导其产生。Sesn2已被公认为是一种强有力的自由基清道夫。有研究表明sestrin2在神经退行性病变(MPTP帕金森模型)中发挥神经保护作用。亦有实验表明sestrin2在肝脏通过加剧Keap1的降解从而起到抗氧化保护作用,减轻了肝细胞的氧化应激损伤。但其在蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期脑损伤(Early brain injury,EBI)中的作用尚未见报道。目的探讨Sestrin2在大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用及机制。方法(1)通过将自体动脉血注入大鼠视交叉前池,建立大鼠SAH模型。(2)建立Sesn2干扰的大鼠SAH模型,于SAH建模前24小时脑室注射Sesn2 Si RNA.(3)观察干扰Sesn2基因对大鼠SAH早期脑损伤后脑组织组织形态学变化(尼氏染色)的影响。(4)通过检测脑组织匀浆中SOD活性和MDA含量,观察Sesn2沉默后对大鼠SAH早期脑损伤后神经细胞氧化应激水平的影响。(5)观察干扰Sesn2基因在大鼠SAH早期脑损伤中对Keap1/Nrf2通路及下游抗氧化酶HO-1、NQO1(Real-time q PCR和Western blot)的表达的影响。结果(1)与SAH组相比,干扰Sesn2后,出血灶脑组织中神经元数量减少、萎缩,尼氏小体消失。(2)同Sham组相比,SAH组中MDA的含量明显增高,而SOD的活性降低。与SAH组相比,干扰Sesn2后,MDA的含量进一步增高,而SOD的活性则降低更加明显,氧化应激水平明显增强。(3)与Sham组相比,SAH组Sesn2、Nrf2、HO-1、NQO1的表达显著增加,Keap1表达降低。与SAH组相比,干扰Sesn2后,Sesn2、Nrf2及抗氧化酶中HO-1、NQO1的表达均明显降低,Keap1的表达明显升高;结论(1)干扰Sesn2可加重SAH后神经细胞组织学损伤及氧化应激水平,提示Sesn2对神经细胞具有一定的抗氧化保护作用。(2)蛛网膜下腔出血(SAH)之后初期Keap1/Nrf2传导通路会被激活,从而也使这一传导通路下游的各种产物的表达被激活,于是使此通路下游的表达产物增加,由此发挥一定的保护神经细胞免受氧化损伤的作用,Sesn2沉默后加重脑氧化应激损伤的机制可能是通过降低Keap1的降解从而抑制Keap1/Nrf2通路,减少其下游一系列抗氧化酶、解毒酶的合成,使氧化应激损伤加剧。