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目的：
检测转录因子Twist、上皮性钙黏附素(E-Cadherin)和波形蛋白(Vimention)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨非小细胞肺癌的发生发展机制,为非小细胞肺癌的早期发现,预后判定和治疗进一步奠定基础。
材料与方法：
采用Streptavidin-Peroxidase(SP)免疫组织化学方法进行染色,检测Twist、E-Cadherin和Vimention在80例NSCLC标本中的表达及其与各临床病理因素之间的关系。另采用免疫细胞化学法检测68例NSCLC所致胸腔积液中肿瘤细胞的表达。为了验证免疫组化的结果,我们比较了20例新鲜肺癌组织标本及癌旁正常肺组织中蛋白和mRNA表达的差别。各组资料利用SPSS for Window13.0进行统计分析。P＜0.05有统计学意义。
结果：
1、Twist在正常支气管上皮细胞和黏膜下腺体细胞的胞浆中呈现弱的信号,根据我们的评分标准判定为阴性表达。在肺癌组织中Twist的阳性信号定位于胞浆,其阳性表达率为71.25％(57/80),明显高于癌旁组织(10.00％)的表达水平(X2=24.81,P＜0.001);E-Cadherin在正常支气管上皮细胞和黏膜下腺体细胞的胞膜中呈连续强阳性表达。在肺癌组织中E-Cadherin的阳性表达率为42.50％(34/80),明显低于癌旁组织(95.00％)的表达水平(X2=17.70,P＜0.01);Vimentin在80例非小细胞肺癌组织中16例染色阳性,阳性率为20.00％。Vimentin在正常支气管上皮细胞和黏膜下腺体细胞不表达。在肺癌组织中Twist的阳性信号定位于胞浆,其阳性表达率为20％(16/80),高于癌旁组织的表达水平。
2、Twist高表达及E-cadherin异常表达均与非小细胞肺癌的组织分化,临床分期及淋巴结转移情况密切相关(P＜0.01)。而与患者性别、年龄、组织类型均未见关联性(P＞0.05)。
3、应用Spearman等级相关分析,非小细胞肺癌中Twist表达和E-cadherin表达呈负相关(r=-0.46,P＜0.01),Twist表达和Vimentin的表达无相关性(r=0.25,P＞0.05)。
4、通过免疫细胞化学发现Twist在68例肺癌胸水中的表达率为77.94(53/68)明显大于良性胸水的表达率6.25％(2/32)(P＜0.05):E-cadherin在68例肺癌胸水中的异常表达率为83.82％(57/68),而在非肺癌胸水的异常表达率为9.375％(3/32),两者表达存在明显差异(P＜0.05)。
5、通过RT-PCR及Western Blot检测发现E-cadherin在非小细胞肺癌组织中的mRNA及蛋白表达水平明显低于癌旁正常组织的表达水平。而Twist和Vimentin的表达水平明显高于癌旁正常组织的表达水平(P＜0.05)。
结论：
1、非小细胞肺癌组织中Twist及Vimentin的表达均显著高于癌旁组织,E-cadherin的表达均显著低于癌旁组织。
2、Twist和E-cadherin的表达与组织分化程度,临床分期及有无淋巴结转移有关,与患者性别、年龄、肿瘤大小均无关。
3、在非小细胞肺癌中Twist表达和E-cadherin表达呈负相关。
4、Twist、E-cadherin在肺癌胸水中的表达水平明显高于良性胸水。