论文部分内容阅读
卵巢癌在女性恶性肿瘤中死亡率居于第一位,其中最常见的上皮性卵巢癌5年生存率长期停留在30%左右,其原因是手术及化疗后复发率很高、易出现耐药。开展针对卵巢癌肿瘤抗原的免疫治疗对提高患者的5年生存率具有重要的意义。P185erbB2在约30%的卵巢癌患者中过度表达,并与患者的预后不良,易出现复发、耐药有关。抗P185erbB2抗体被证明具有下调P185erbB2表达水平的作用。因此,本文首先研制了抗P185erbB2嵌合抗体用于P185rebB2过度表达的卵巢癌的免疫治疗。 应用P185erbB2过度表达的SKBR3细胞免疫BALB/c小鼠,采用P185erbB2胞外区重组蛋白以ELISA方法筛选杂交瘤阳性克隆,获得了10株单克隆抗体。通过采用固相竞争放射免疫方法分析这10株抗人P185erbB2单抗的抗原表位、亲合力,ELISA,细胞ELISA、Western Blot、免疫组化等方法鉴定抗原识别的特异性,以及体外对P185erbB2过度表达的SKOV3和SKBR3肿瘤细胞增殖的抑制,从中筛选出一株具有较高亲和力、可特异性地识别天然的P185erbB2胞外区抗原并具有抑制P185erbB2过度表达的肿瘤细胞增殖的生物活性的单抗C25。进一步的体外实验表明,C25单抗以剂量依赖方式特异地抑制P185erbB2过度表达的卵巢癌细胞的增殖,其抑瘤效果与Herceptin的亲本鼠单抗相似,远好于商品单抗L87。并且C25单抗在体外与卵巢癌一线化疗药物联合应用对卵巢癌细胞增殖的抑制实验结果显示,C25单抗与顺铂联合具协同作用,与泰素具相加作用。通过对细胞周期的分析发现C25单抗对卵巢癌细胞增殖的抑制主要是通过G1期阻滞而实现的。应用C25单抗对人卵巢癌裸鼠移植瘤