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哺乳动物卵母细胞减数分裂成熟的调控是动物生殖的关键环节之一,受包括促性腺激素在内的多种信号分子的调节.一氧化氮(NO)是一种广泛参与机体生理调节过程的重要信号分子.目前有关NO对哺乳动物卵母细胞成熟影响的研究较少且相互有冲突.该论文采用小鼠超排卵母细胞、体外自发成熟、促性腺激素(FSH)诱导成熟或卵泡卵母细胞成熟四种模型,系统地研究了NO对小鼠卵母细胞体内、外成熟的影响并探讨了其作用机制.研究结果表明:腹腔注射一氧化氮合酶(NOS)非选择性抑制剂左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)对体内小鼠卵母细胞的生发泡破裂(GVBD)没有影响,但能剂量依赖性地抑制卵母细胞第一极体(PB1)的排出,此抑制可被同时注射的一定剂量的NO合成底物左旋精氨酸(L-arg)和NO供体硝普钠(SNP)逆转.结果提示,NO能促进小鼠卵母细胞的体内成熟.一定剂量的FSH能诱导HX阻滞的CEO的成熟,此促进可被NOS抑制剂L-NAME和AG剂量依赖性地抑制,而SNP和FSH在HX阻滞的成熟中没有协同效应.SNP单独处理能使卵丘细胞离散,和FSH联合使用能显著抑制FSH对卵丘的扩展作用.cGMP类似物8-Br-cGMP能显著抑制FSH的促卵母细胞成熟效应.结果提示,NO/cGMP参与体外促性腺激素诱导小鼠卵母细胞的成熟过程.一定浓度的PDE4选择性抑制剂rolipram对CEO的自发成熟没有影响,但能促进卵泡卵母细胞的成熟;PDE3选择性抑制剂cilstomide和PDE5选择性抑制剂zaprinast均能剂量依赖性地显著抑制小鼠卵母细胞的自发成熟,其中PDE5抑制剂对卵母细胞自发成熟的抑制作用能被GC的抑制剂ODQ和NOS抑制剂L-NAME逆转,但对FSH促卵母细胞成熟的抑制效应却只能被ODQ逆转,而不能被L-NAME逆转.结果提示,PDE在卵泡卵母细胞和卵泡细胞中的分室化表达和调控,分别调节两室中的cAMP和/或cGMP的动态变化而参与调节小鼠卵母细胞减数分裂的阻滞和恢复过程.总上所说,我们的研究结果可以清楚地表明,卵丘细胞产生的内源性NO能促进小鼠卵母细胞的成熟,而外源性NO却赖于其浓度通过卵丘细胞双重调节(促进或抑制)小鼠卵母细胞的成熟过程.其调节机制有可能是通过改变卵丘细胞中的环核苷酸的水平和激活PKC来实现的.