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茯苓为多孔菌科真菌Poria cocos (Schw.) Wolf 的干燥菌核,是我国传统常用中药材。茯苓药材的质量评价方面,目前主要采用的方法是鉴别植物形态、性状、显微鉴别、理化鉴别(分别检查甾醇和多糖),缺乏有效成分的定性鉴别和含量测定方法。本论文对茯苓的有效成分三萜类物质进行了研究,目的在于寻找其中特征性成分作为化学对照品,建立相应的定性及定量方法,制定茯苓药材的质量标准,主要研究结果如下: 1) 茯苓药材化学对照品的制备及结构确认经溶剂萃取、硅胶柱层析、制备型HPLC、重结晶等方法,对茯苓药材的乙醇提取物进行分离,得到2 个化合物。采用理化性质和波谱技术(UV、IR、EI/MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT)相结合的方法鉴定了其结构,分别为茯苓酸(Pachymic acid) 和猪苓酸C(Polyporenic acid C)。其中,应用二维核磁共振技术(1H-1HCOSY、HMBC、HMQC)归属了茯苓酸中所有的碳、氢原子信号。茯苓药材中茯苓酸的含量较高且专属性强,确定其为对照品,HPLC 法标定其纯度为98.54%。2) 茯苓药材三萜类成分薄层色谱鉴别通过对10 个不同的市售茯苓药材进行薄层色谱条件的筛选,最终确定了使用硅胶G 薄层板,氯仿-乙酸乙酯-甲酸(10:1:0.2)为展开剂,喷10%硫酸乙醇溶液加热显色进行检识。供试品色谱中,显示出4 个清晰的紫红色斑点;在与对照品色谱相应位置上,观察到相同的紫红色斑点。该方法简便、快速、重现性好、结果可靠。3) 茯苓药材中总三萜的含量测定以茯苓酸为对照品,用香草醛—冰乙酸溶液、高氯酸显色, 采用分光光度法在540nm 波长处测定了茯苓中总三萜的含量;并进行了相应的方法学考察。茯苓酸在59.2177.6μg 范围内,线性关系良好,其回归方程为:Y=0.003754X-0.041 ,r=0.9992。通过测定不同产地的10 个样品,初步确定总三萜在相应药材中的含量不得少于0.45%。4) 茯苓药材中有效成分茯苓酸的HPLC 含量测定采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Phenomenex Luna C18柱,4.6mm×150mm,5μm),柱温25℃,乙腈-0.1%乙酸水(75 : 25)为流动相,流速1mL·min-1,210nm 波长检测;并进行相应的方法学考察。茯苓酸在1.527.60μg 范围内线性关系良好,其回归方程为:Y=2.65969×10-6X-0.103923,r=0.99942。通过测定不同产地的10 个样品,初步确定茯苓酸在相应药材中的含量不得少于0.035%。该方法准确、简便,可以应用于茯苓的质量控制。