【摘 要】
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苯是芳香族化合物,在工业中应用广泛,生活中暴露机会多。急性苯中毒可致再生障碍性贫血和中枢神经系统抑制,慢性苯中毒主要损害血液系统。目前认为,苯的毒性主要是苯的代谢产
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苯是芳香族化合物,在工业中应用广泛,生活中暴露机会多。急性苯中毒可致再生障碍性贫血和中枢神经系统抑制,慢性苯中毒主要损害血液系统。目前认为,苯的毒性主要是苯的代谢产物所致,但对苯代谢产物引起造血系统损伤机制及其与儿童白血病的关系尚不十分清楚。为探讨苯代谢产物对造血系统损伤及其毒作用机制,本研究以体外培养幼鼠原代骨髓细胞为模型,采用MTT法检测苯代谢产物对细胞生长的抑制作用;生物化学方法检测苯代谢产物对细胞的氧化损伤作用;流式细胞术(FCM)检测苯代谢产物对细胞周期的影响;同位素掺入法检测苯代谢产物对细胞DNA损伤作用;生物化学方法检测苯代谢产物对苯代谢相关的髓过氧化物酶(MPO)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性的影响;免疫细胞化学法和Western Blot方法检测MPO蛋白水平的变化;RT-PCR方法检测GST基因转录水平的变化;FCM术检测苯代谢产物对细胞凋亡的影响,免疫细胞化学法检测凋亡的线粒体通路相关蛋白表达。研究结果表明:苯代谢产物儿茶酚、氢醌均可抑制幼鼠骨髓细胞生长,儿茶酚、氢醌联合作用性质为协同作用;引起细胞氧化损伤;可抑制细胞DNA合成、引起程序外DNA修复合成增加;诱导代谢增毒酶MPO蛋白表达增加,酶活性增强;诱导代谢解毒酶GSTM1转录增加和酶活性改变;诱导细胞发生S期阻滞,通过凋亡发生的线粒体通路诱导细胞凋亡。本研究对于深入了解苯及其代谢产物对幼鼠造血系统毒作用及相关机制具有重要的理论意义,为进一步探讨苯及其代谢产物与儿童白血病的关系提供了实验依据。
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