【摘 要】
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结直肠癌是我国及全球高发的一种恶性肿瘤,在我国的发病率及致死率位列恶性肿瘤前列,均分居第5位1.结直肠癌的致病机制目前尚未完全阐明,作为一种演变过程极为复杂的恶性肿瘤,在其发生的驱动及进展过程中,伴随着多个致病基因的突变及分子信号通路的异常改变2-3.随着精准医疗的不断发展,结直肠癌分子靶向治疗的概念深入人心。因此,深入挖掘结直肠癌相关的致病因子是目前结直肠癌领域的研究热点。前期我们通过蛋白组学同
【基金项目】
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广州市科技计划项目（7415696196402）；
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结直肠癌是我国及全球高发的一种恶性肿瘤,在我国的发病率及致死率位列恶性肿瘤前列,均分居第5位1.结直肠癌的致病机制目前尚未完全阐明,作为一种演变过程极为复杂的恶性肿瘤,在其发生的驱动及进展过程中,伴随着多个致病基因的突变及分子信号通路的异常改变2-3.随着精准医疗的不断发展,结直肠癌分子靶向治疗的概念深入人心。因此,深入挖掘结直肠癌相关的致病因子是目前结直肠癌领域的研究热点。前期我们通过蛋白组学同位素标记相对和绝对定量技术（Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation,ITRAQ）鉴定并获得了相关与结直肠癌发生发展密切相关的致病因子4。我们发现细胞周期蛋白依赖激酶5（cyclin-dependent kinase 5,CDK5）在结直肠癌组织中异常表达。深入的文献追溯发现,CDK5作为一个多功能激酶,能够调控细胞生存、增殖、迁移等多个生理学功能,具有较高的研究价值。为此,我们将CDK5列为潜在的结直肠癌促癌因子,开展深入的研究工作。方法:1.CDK5在结直肠癌组织中的表达情况及其与结直肠癌患者临床预后评估中的价值探讨（1）.免疫组化（Immunohistochemistry staining,IHC）、免疫印迹法（Western blot）、TCGA高通量测序数据分析检测CDK5及p35在结直肠癌的表达情况;（2）.利用组织芯片技术、x2检验、Cox回归分析及Kaplan-Meier法等统计学方法探讨CDK5表达量与结直肠癌患者临床特征学、生存预后等重要指标的相关性。2.CDK5表达异常对结直肠癌细胞生物学特性的影响（1）.体外细胞生物学实验:慢病毒转染技术构建CDK过表达及沉默的稳定表达结直肠癌细胞株,采用CCK8增殖实验、平板克隆、软琼脂克隆形成、细胞周期及Transwell小室侵袭、迁移等多个实验进行探讨;（2）.体内细胞生物学实验:利用慢病毒细胞株进行裸鼠尾静脉注射,构建肺部转移瘤模型,观察CDK5异常表达对结直肠癌细胞体内侵袭能力的影响。3.表达谱芯片探讨CDK5促进结直肠癌发生发展的分子机制利用Agilent 4×44K的人全基因组表达谱芯片对CDK5沉默后的HCT116细胞株进行基因组学实验,并利用Ingenuity Pathway Analysis（IPA）数据库进行数据分析,筛选与CDK5相关的分子信号通路及基因。4.CDK5调控ERK5信号通路的精细分子机制及其对结直肠癌恶性演变的作用探讨采用体外激酶技术、凝胶迁移实验技术、双荧光素酶报告基因技术、western-blot技术、免疫荧光技术探索CDK5调控ERK5-AP-1信号通路的方式;采用平板克隆、裸鼠原位移植瘤形成实验及临床标本相关性验证CDK5-ERK5-AP-1参与结直肠癌恶性演变。结果:1.CDK5及p35在结直肠癌组织中表达显著高于配对癌旁组织:western-blot显示CDK5及p35在10例肿瘤组织中均呈现阳性表达,且表达程度明显高于正常配对肠黏膜组织;同时,组织芯片免疫组化的结果显示CDK5在85例（95.5%）结直肠癌组织中阳性表达,包括49例（55.1%）强阳性表达及40例弱阳性（44.9%）表达。2.CDK5表达与患者临床特征学密切相关:x 2检验结果显示CDK5表达与AJCC分期（P=0.01）,肿瘤分化程度（P=0.029）,肿瘤大小（P=0.001）及淋巴结转移（P=0.027）等重要临床指标相关。多因素回顾分析显示CDK5高表达（HR:2.428,95%CI:1.089-5.413;P=0.030）是预测患者预后水平的独立危险因素;Kaplan-Meier生存分析显示,CDK5高表达患者的总体生存时间明显低于CDK5低表达的患者（44月versus 54月,P=0.001）。3.CDK5高表达促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力,沉默CDK5的表达则起到相反的作用效果。4.表达谱芯片结果显示CDK5参与调控多个包括细胞增殖、细胞生存、细胞运动、DNA转录活动等在内的多个细胞功能学活动;参与调控多条细胞内关键信号通路,且以对ERK5信号通路影响最为显著。5.CDK5通过介导ERK5（Thr732）位点的磷酸化,调控ERK5-AP-1及其下游关键因子的表达,促进结直肠癌细胞的成瘤能力。6.CDK5-ERK5-AP-1信号通路在临床样本中的表达水平显著线性正相关。结论:本研究系统地探讨了 CDK5在结直肠癌系统中扮演的角色,阐述了 CDK5可作为结直肠癌临床预后的分子标志物及其通过介导ERK5-AP-1信号通路促进肿瘤恶性演变的过程,明确了 CDK5在结直肠癌中的促癌作用,作为潜在的分子治疗靶点,具有较高的研究价值和临床指导意义。
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研究背景和目的急性心肌梗死（AMI）后随之出现的左心功能不全和心脏衰竭,具有较高的发病率和死亡率[1]。心梗后临床干预措施是有效地打开闭塞的血管和重建冠状动脉血流,如血管成形术或溶栓药物。然而,其对减轻缺血期或再灌注时的心肌损伤疗效不确切。大量的研究已经证实,线粒体酶乙醛脱氢酶-2（ALDH2）是一种参与保护心脏的关键酶,它通过介导激活醛,如乙醛和4-羟基-2-壬烯醛（4-HNE）的解毒以及硝酸甘
研究背景:心肌能量代谢参与心力衰竭的发生与发展,能量代谢成为近年来心力衰竭的研究热点。过氧化物酶体增殖物激活受体辅激活因子（peroxisome proliferator activated receptor gamma coactivator-1 alpha,PGC-1α）是一种核受体的辅激活因子,与线粒体密切相关,它能与多种核受体结合,在能量代谢中发挥重要作用。目前,PGC-1α的研究众多,但
前列腺癌（prostate cancer,PCa）是严重威胁中老年男性健康的常见恶性肿瘤之一,2008年前列腺癌发病率居全球男性恶性肿瘤第2位（仅次于肺癌）,占男性全部恶性肿瘤发病例数的14%。在欧美发达国家,其发病率已超过肺癌连续10年居男性恶性肿瘤首位,而死亡率仅次于肺癌居第二位。美国前列腺癌发病率居所有男性恶性肿瘤的第1位,约占所有男性恶性肿瘤发病率的29%。近年来我国前列腺癌发病率呈现持续
研究背景急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）是一组以肾功能急剧减退为特征的临床综合征。顺铂引起的急性肾损伤模型成为了一个研究各种类型急性肾损伤的早期病理生理特征的一个比较理想的动物模型。同型半胱氨酸是一种含硫氨基酸,生成于甲硫氨酸代谢转变为半胱氨酸的生物过程中。近年来,我国高同型半胱氨酸血症的发生率呈增加的趋势。血红素加氧酶是分解代谢血红素过程中的限速酶,在多种急性肾损伤模
目的探讨成年烟雾病患者脑微出血（CMBs）的分布模式及其与颅内血管形态学的联系。并观察CMBs及其分布模式对再发脑血管事件的影响。方法连续入选南京军区南京总医院2009年6月至2013年3月间首次经脑血管造影证实的成年烟雾病患者135例。对所有患者进行3.0 T磁共振磁敏感成像（SWI）检查并依照CMBs病灶的分布区域分组。比较各组间包括年龄、性别、高血压、糖尿病、高脂血症、临床症状、起病时间以及
世界上10%的人受到精神疾病的困扰。2010年,有7亿人口罹患精神疾病。花费在精神卫生方面的财力在2010年为25000万亿美金;到了 2030年,这个数值将会突破60000万亿美金。抑郁症在精神疾病所造成的社会财富流失中所占比例最大;接下来依次是焦虑症、药物滥用、酒精成瘾、精神分裂症、双向性精神障碍等。抑郁症以其高发、高致残率以及对社会带来的沉重负担而影响着人类的精神健康。首先,抑郁症发病率高:
研究背景鼻咽癌（Nsopharyngeal carcinoma,NPC）是鼻咽上皮源性恶性肿瘤,是我国南方和东南亚地区常见的头颈部恶性肿瘤之一。据报道全世界每年大于80%的新增病例发生在这些地区,其中中国的广东人群发病率最高。高发区人群在移居其它地区后,仍保持较高的发病率。10%的鼻咽癌患者有肿瘤家族史。提示除了环境因素和EB病毒感染之外,遗传易感性在鼻咽癌发病中起着非常重要作用。此外,鼻咽癌的发
背景和目的鼻咽癌是我国华南地区高发的恶性肿瘤之一。鼻咽癌病因学研究表明:EB病毒感染和环境因素（促癌物和/或致癌物,如TPA、丁酸、亚硝胺类等）在致癌过程中均可能起十分重要的作用。但是,迄今为止,鼻咽癌病因尚未明确,发病机制亦不十分清楚,这给NPC一级预防（病因预防）带来极大困难。因此,继续探索鼻咽癌病因和发病机制仍具有重要意义和现实紧迫性。目前,NPC主要治疗手段是放疗。随着适型调强放疗技术的推
研究背景胆管癌起源于肝内胆管、肝门部和远端胆管树上皮细胞。尽管手术结合使用吉西他滨联合顺铂化疗有了重大改进,胆管癌患者的预后仍然较差,中位生存期少于一年。近十年来的研究表明,多种癌基因或抑癌基因的失调控与包括胆管癌的人类癌症的恶性进展有关。因此,揭示胆管癌发生和发展的潜在机制可能有助于建立有效的治疗策略。各种类型细胞分泌的趋化因子在趋化性中发挥核心作用。按照保守半胱氨酸残基的顺序,趋化因子被分为C
背景和目的:鼻咽癌是我国南方常见的恶性肿瘤,其发生与地域、遗传因素、生活习惯、饮食及EB病毒感染等有关。其主要的治疗方案为放疗联合化疗的综合治疗。鼻咽癌病人发生转移的预后较差。其主要的转移部位为骨、肺、肝。慢性肝病在我国越来越常见,但慢性肝病对鼻咽癌肝转移的影响尚不清楚。本研究通过对临床病例的分析,探讨乙型肝炎病毒感染和脂肪肝对鼻咽癌肝转移的影响。方法:本研究选取了 2005年1月和2015年12