腹泻儿童沙门菌耐药性与肠毒素基因的研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuwumalan
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目的:研究本地区近几年沙门菌肠炎患儿的临床特征、耐药状况及其与肠毒素之间的关系;同时对耐药沙门氏菌株与敏感沙门氏菌株之间的毒力差异进行比较,为临床病情的判断与治疗提供依据。方法:对2004年4月至2009年12月在江西省儿童医院就诊的腹泻患儿粪便中分离出的80株沙门菌,采用血清学凝集试验鉴别和确定沙门菌的血清型,通过Kerby-Bauer纸片扩散法检测沙门氏菌对18种抗菌药物的敏感性;同时应用PCR法对肠毒素基因(spvA、spvB、rck)进行检测,结合临床特征,分析沙门菌肠炎患儿的临床特征、耐药状况及其与肠毒素之间的关系。用2ml PH4.0的新鲜LB培养基培养沙门菌,适当稀释后接种LB琼脂板,计算平板上的集落生成单位;沙门氏菌液经胃管注入到6-8周龄的雌性小鼠胃内,2周后观察小鼠的死亡数量、死亡小鼠肝脾指数、有无腹泻等,用生理盐水处理的小鼠作为对照,以了解耐药沙门氏菌株与敏感沙门氏菌株之间的毒力差异。结果:沙门菌肠炎患儿的主要临床表现为发热、腹泻。鼠伤寒沙门菌是小儿沙门菌肠炎的主要血清型(70/80,87.50%)。80株沙门菌对亚胺培南、美洛培南均敏感,对另外16种抗生素均有不同程度的耐药。80株沙门菌中有66株沙门菌为多重耐药菌株,8株为可疑产AmpC酶菌株,17株为可疑产ESBLs菌株,鼠伤寒沙门菌的多重耐药率明显高于其它血清型(x~2=30.921,p=0.001)。80株沙门菌均含有spvA基因,但只有19株含有spvB基因、16株含有rck基因,spvB阳性者表现为高热的比率较spvB阴性者高(x~2=7.544,p=0.006),spvB阳性者表现为排粘液血便的比率较spvB阴性者高(x~2=6.163,p=0.013)。沙门氏菌株在酸性环境中生长均会减少,但只有敏感菌在酸性环境中培养1小时、2小时比非酸性条件下培养生长的菌落数有明显减少(分别为p=0.046,p=0.005),且耐药菌株对小鼠的半数致死量明显小于敏感菌株(t=2.885,p=0.034)。结论:发热、腹泻为沙门菌肠炎患儿主要的临床表现,鼠伤寒沙门菌是沙门菌肠炎中最为重要的病原菌,鼠伤寒沙门菌的多重耐药率明显高于其它血清型沙门菌, spvB阳性菌株感染者更易出现高热及排粘液血便,耐药菌株的毒力强于敏感菌株,临床上需根据药敏结果合理使用抗生素。
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