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目的：精氨酸甲基化转移酶6（Protein arginine methyltransferase6,PRMT6）甲基化组蛋白H3R2、H4R3和非组蛋白；PRMT6的主要功能有转录调控、RNA选择性剪切、DNA复制和细胞周期调控方面。本课题阐明了FBXO24通过结合在PRMT6的C-末端VGGRF序列来诱导其经泛素-蛋白酶体途径降解。 方法：构建稳定敲除PRMT6的H1299细胞株，克隆形成实验结果表明稳定株的克隆数远远少于对照组；细胞迁移与侵袭实验发现敲除PRMT6后H1299细胞的迁移侵袭能力大大降低。基于数据库发现PRMT6在癌组织中表达高于癌旁组织，生存曲线分析表明高表达PRMT6癌症患者明显低于低表达的存活率。 Cycloheximide（CHX）是蛋白合成抑制剂，用CHX处理H1299细胞不同时间，PRMT6的蛋白水平不断降低，表明PMRT6存在降解。用泛素-蛋白酶体抑制剂MG132和CHX联合作用H1299不同时间，发现PRMT6的蛋白水平几乎无变化。免疫共沉淀实验结果显示PRMT6在细胞内存在多泛素化修饰，过表达HA-Ub导致PRMT6的降解；上述结果揭示PRMT6在H1299细胞内通过泛素-蛋白酶体途径降解。 结果:前期实验结果表明FBXO24能够诱导PRMT6的降解；免疫共沉淀实验发现PRMT6与FBXO24有相互作用；过表达FBXO24，发现PRMT6的蛋白水平与FBXO24表达量成反比；通过H1299细胞筛选出敲低FBXO24效果最佳的sh RNA质粒，然后转染到H1299细胞中，并用CHX处理，发现敲低FBXO24组的PRMT6蛋白水平明显高于对照组；H1299细胞中转染FBXO24，IP实验发现FBXO24可以增加PRMT6的泛素化；以上结果证明了FBXO24能够诱导PRMT6的降解。 构建PRMT6的截短突变体，对转染细胞用MG132处理，分析泛素化位点为K360、K367、K369;构建PRMT6的K360、K367、K369点突变体，与FBXO24的共转染实验，发现PRMT6-K369几乎无降解；细胞中转染PRMT6点突变体，半衰期实验表明PRMT6-K369最稳定；这些结果揭示PRMT6的泛素化位点是K369；FBXO24结合在PRMT6的C末端；构建PRMT6的截短突变体，与FBXO24的免疫共沉淀实验表明，FBXO24与PRMT6的VGGRF序列结合。 将PRMT6-K360、PRMT6-K367、PRMT6-K369转染到稳定敲除PRMT6的H1299细胞中，结果表明转染了PRMT6-K369的实验组的蛋白水平最高；PRMT6稳定敲除的H1299细胞中转染点突变体后检测细胞周期，结果表明PRMT6-K369组的G0/G1比例最低，并且S期比例最高；构建稳定表达FBXO24的H1299细胞株的PRMT6水平相对于空白细胞明显偏低；克隆形成实表明稳定胞株的克隆数相远低于对照组；细胞迁移和侵袭实验表明PRMT6的减少可以明显降低H1299细胞的迁移侵袭能力；以上结果证明了PRMT6的水平与H1299细胞的细胞周期、增殖、迁移、侵袭能力密切相关。 结论：SCF-FBXO24与PRMT6的VGGRF序列结合诱导PRMT6在H1299细胞中通过泛素-蛋白酶体途径降解；PRMT6泛素化修饰位点位于K369残基；降低细胞内PRMT6的水平可以影响细胞周期导致细胞增殖抑、降低细胞迁移与侵袭能力。