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目的本课题采用健康雄性昆明种小鼠,每日1次腹腔注射环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX),共3次,造成化疗致骨髓抑制模型,通过观察针灸对CTX骨髓抑制小鼠骨髓组织中粘附分子ICAM-1、VCAM-1蛋白表达的调节,探讨针灸对CTX小鼠骨髓造血微环境的影响,从针灸改善CTX小鼠骨髓造血微环境的角度揭示其改善化疗后骨髓抑制,促进造血功能的恢复,提升外周血白细胞的作用机制。方法将7周龄健康雄性昆明种小鼠,称量后依据体重随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组4组。空白组小鼠腹腔注入同体积的生理盐水,剩余3组小鼠按照100mg/kg/d用药量,腹腔注射CTX溶液(按照小鼠体重0.02ml/g用药量,浓度为5mg/ml),停药后4h模型即成。在造模后4h相同时间,针刺组、艾灸组小鼠分别选取“大椎”、“膈俞”、“肾俞”、“足三里”给予针刺和艾灸治疗,空白组、模型组陪同固定,连续在每天相同时间内治疗。同时分别在造模前、造模后及治疗3天、5天后割尾取血,检测外周血白细胞。在治疗3天、5天后,分别处死一批小鼠,取出股骨,用4%多聚甲醛固定标本,石蜡包埋,4μm厚切片。用免疫组化法观察骨髓组织中粘附分子ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达。数据分析采用SPSS13.0 for Windows统计分析软件。结果1针灸能够提升化疗小鼠外周血白细胞。造模后,与正常组相比,模型组、针刺组、艾灸组小鼠外周血白细胞均降低,有显著差异(P<0.05),说明造模成功;治疗3天后,与模型组相比,针刺组、艾灸组有所升高,无显著性差异(P>0.05),针刺组较艾灸组升高,无显著性差异(P>0.05);治疗5天后针刺组、艾灸组小鼠外周血白细胞持续升高,针刺组与空白组、模型组相比有显著差异(P<0.05),艾灸组也升高,但与针刺组相比,无显著性差异(P>0.05)。2治疗3天后,针刺组、艾灸组小鼠骨髓组织中粘附分子ICAM-1蛋白表达均上升,与模型组比有显著差异(P<0.05),艾灸组高于针刺组,无显著性差异(P>0.05);治疗5天后,针刺组、艾灸组ICAM-1均升高,与模型组相比,均有显著性差异(P<0.05),与针刺组相比,艾灸组高于针刺组,无显著性差异(P﹥0.05)。3治疗3天后,与模型组比,针刺组、艾灸组小鼠骨髓组织中粘附分子VCAM-1蛋白表达均上升,无显著性差异(P﹥0.05),艾灸组高于针刺组但无显著性差异(P﹥0.05);治疗5天后,针刺组、艾灸组VCAM-1均升高,与模型组相比,无显著性差异(P﹥0.05),艾灸组高于针刺组但无显著性差异(P﹥0.05)。结论1针灸可以改善化疗后骨髓抑制,促进造血功能的恢复,升高外周血白细胞,其作用随着治疗次数的增加呈现一定的规律性。结合前期导师组的研究成果,针灸可以提升外周血白细胞,疗效是确切的。2 CTX可以使小鼠骨髓组织中粘附分子ICAM-1表达下降,针刺、艾灸可以促进CTX小鼠骨髓组织中粘附分子ICAM-1表达,利于造血细胞与组织之间的粘附和信息交换,增强造血细胞对细胞因子的敏感性,参与机体造血的调控,修复骨髓造血微环境的损伤,进而提升外周血白细胞。3 CTX可以使小鼠骨髓组织中粘附分子VCAM-1表达下降,针刺,艾灸能够促进CTX小鼠骨髓组织中粘附分子VCAM-1表达,促进造血细胞与基质细胞形成聚集体,以利于造血细胞增殖分化,提升外周血白细胞。