兔不同切削厚度的LASIK术后MMP表达的实验研究

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目的:研究不同切削厚度的准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situkeratomileusis,LASIK)后基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMPs)的表达,以探讨LASIK手术的切削深度不同对角膜的胶原结构的影响。方法:选取成年新西兰白兔44只(88眼)随机分成A(n=22,正常对照组)、B、C、D四个组。B、C、D组分别行LASIK手术使残留的基质床厚度为整体角膜厚度的70%、50%、30%。术后6个月,分析角膜地形图;ELISA法检测各组角膜明胶酶(MMP-2,MMP-9)的含量;明胶酶谱法检测角膜组织的明胶酶活性;RT-PCR法检测TIMP-2 mRNA的表达量;每组随机取一眼行透射电镜检查。结果:1、ELISA法检测结果:术后6个月,各组均有MMP-2,MMP-9的表达,MMP-2表达差异无统计学意义(F=0.456,P>0.05);MMP-9表达差异无统计学意义(F=1.676,P>0.05)。2、明胶酶谱法检测结果:术后6个月,各组角膜组织均有明胶酶MMP-2的活性表达,差异无统计学意义(F=2.273,P>0.05),各组均无MMP-9的活性表达。3、RT-PCR法检测结果:术后6个月,各组均有TIMP-2 mRNA的表达,差异无统计学意义(F=0.003,P>0.05),各组TIMP-2 mRNA的表达量随切削量的增加无差异。4、角膜地形图检测结果:各组均未发现圆锥角膜。各组兔术前角膜后表面Diff值(后表面距理想球面的距离)差异无显著意义(F=0.415,P>0.05)。手术组B、C、D组术后与术前后表面Diff值比较各组角膜后表面均有前突的趋势,B组差异无统计学意义(t=2.00,P>0.05),C、D组差异均有显著意义(P<0.05)。术后6个月手术组B、C、D组后表面前突的变化量(即术后与术前的差值)结果比较:各组差异均有显著意义(F=356.7,P=0.000)。随着LASIK手术切削量的增加,角膜后表面Diff值增大,角膜后表面Diff变化量也增大。5、透射电镜检查结果:LASIK术后6个月各组角膜板层纤维排列整齐规则,与正常角膜无差异。无成纤维细胞线粒体增多,肿胀,空泡形成及粗面内质网增多等异常现象。结论:兔正常角膜有MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表达;LASIK术后6个月各组角膜细胞MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表达与正常角膜无差异,如有继发性圆锥角膜的发生并非是由于手术本身引起的主要胶原降解增多所导致,可能与遗传易感性及生物力学相关,具体作用机制有待进一步研究。
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