HBsAg负载DC细胞治疗慢性乙型肝炎前后血清Th1/Th2水平的研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ERICAMBER
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:乙型肝炎病毒(Hepatitis B vires HBV)是很小的包膜病毒,HBV-DNA和HBV特异P蛋白由核壳包裹成为核心颗粒,再由含HBsAg的脂蛋白外膜包裹成完整的病毒颗粒。病毒基因组是3.2kb的部分双链DNA,为嗜肝病毒,它的感染可造成乙型肝炎的发生。进一步可发生肝硬化、肝细胞癌等终末期肝病,严重危害人类健康。 采取临床慢性乙型肝炎患者外周血,分离树突细胞,进行体外培养、扩增后以表面抗原负载制备成特异的DC疫苗,行自体回输。观察患者肝功能、HBV-DNA等指标的变化,同时以酶联免疫技术分别检测DC疫苗治疗前后患者体内Th1/Th2水平的变化,Th1选取INF-γ代表,Th2选取IL-4为代表,判定DC疫苗治疗慢性乙型肝炎的疗效。测定DC疫苗治疗后患者体内ICAM-1及ICAM-3的水平,比较疗效存在差异者上述两因子的血清水平,判定其是否为DC疫苗治疗效应的影响因子。为临床乙型肝炎的免疫治疗提供理论依据。 方法:选取2004年5月-2007年5月河北医科大学第一医院肝病中心门诊或住院慢性乙型肝炎患者37例,其中男性30例,女性7例,年龄18岁-63岁,平均(37)岁。入选患者无其它肝炎病毒合并感染及严重并发症,DC治疗前半年内未进行过干扰素或核苷类似物的药物治疗,全部获得了知情同意。诊断标准符合2000年修订的《病毒性肝炎防治方案》及2005《慢性乙型肝炎防治指南》。采用自身前后对照试验,在无菌条件下抽取受试者外周静脉血20ml,肝素抗凝,在百级试验室进行下面操作:生理盐水1:1稀释抗凝血,层加到淋巴细胞分离液2000r/min离心30min,分离出外周血单核细胞并计数,用1640液洗2次,再加入含有体积分数150ml/L人AB血清的1640完全培养基重悬细胞,以2×109/L的细胞浓度加入一次性6孔培养板中,于37℃50ml/LCO2饱和湿度下培养4h,弃上清液,再用1640培养液轻洗2次,除去非贴壁细胞,加入含8335μkat/LrhGM-CSF和8335μkat/LrhIL-4的完全培养基,隔日换液,培养至第6天再加入终浓度为2.5mg/L的HBsAg,4h后加入终浓度为10μg/L的TNF,继续在37℃50ml/LCO2饱和湿度下培养1d,收获DC用生理盐水洗涤2次并计数,即刻在受试者腋下部位常规消毒后经皮下注入体内。同时取细胞沈液做无菌实验。回输2次为一个疗程(间隔2wk),每位患者均治疗2个疗程。分别检测治疗前及治疗结束1月后的肝功能、HBV-DNA。留取患者治疗前及治疗1月后的血清,冻存于-80℃冰箱,集中检测IL-4、IFN-γ。同时检测治疗后患者血清的ICAM-1、ICAM-3,检测步骤严格按试剂说明书的检测步骤进行。在回输治疗前后检测指标一致的基础上,对DC疫苗治疗慢性乙型肝炎做自身比较。结果: 1.治疗前后患者生化学指标:ALT、AST在治疗后明显下降,有统计学意义P<0.001(表1)。 2.治疗前后患者病毒学指标:DC治疗前后HBV-DNA下降大于2.01og10的19例,有效率:51.4%。(表2) 3 治疗前后患者血清Th1/Th2血清表达水平(表3):DC治疗后IFN-γ明显升高,t=3.51,P<0.0001,有统计学意义。IL-4治疗后明显下降,t=2.12,P=0.03,<0.05,有统计学意义。 4 治疗后患者疗效及血清ICAM-1、ICAM-3水平(表4、5):DC治疗后有效者19例,无效者18例,有效与无效两组间ICAM-1、ICAM-3比较,ICAM-1方差齐性检验:P=0.1372,>0.1,t检验:t=0.33,DF=3 1,P=0.7421,>0.05。ICAM-3方差齐性检验:P=0.1223,>0.1,t检验:t=1.49,DF=31,P=0.1475,>0.05,无统计学意义。 结论: 乙型肝炎患者慢性化的主要原因是细胞免疫功能降低,不能有效清除机体内的乙型肝炎病毒,分离患者自身外周血中的DC,行体外培养、扩增后以HBsAg负载制备成特异性DC疫苗行自体回输,可有效提高患者APC的提呈功能,有效改善Th1/Th2的失衡,促进Th1型细胞因子的分泌,反向抑制Th2型细胞因子的分泌,Th1型细胞因子占优势可有效激活并促进细胞免疫,促进病毒的清除。 ICAM-1及ICAM-3对DC疫苗治疗慢性乙型肝炎的疗效在理论上应有一定的影响作用。病毒学应答好与应答较差者ICAM-1及ICAM-3的血清水平应存在差异,而在本试验DC治疗后血清中ICAM-1、ICAM-3在有效与无效两组间比较无明显差异。
其他文献
众所周知,作者是出版企业持续发展的核心资源,谁拥有了优秀的、强大的作者资源,谁就有了占领市场的法宝。正如著名出版家小赫伯特.S.贝利在《图书出版的艺术和科学》中说:“
专有出版权是出版社在激烈市场竞争中的“命门”和“利器”。本文从《出版管理条例》和《著作权法》的角度分析了自然人享有专有出版权的原因,从《合同法》的角度分析了解除
中国人民大学新闻学院教授、 中国新闻史学会会长方汉奇,近些年来一直同江西省九江县委机关青年干部胡荣彬保持书信联系。不久前,他又去信给小胡说:“……发现徐墓到为徐宝璜先
课题调查说明调查范围:2007年12月至2008年3月项目组成员对黑龙江省黑河市的北安、牡丹江市的宁安两个县级市和哈尔滨市四个区下辖的10个乡镇20个行政村进行了为期4个月的调
目的:对石家庄市事业单位公务员这一人群的脉压(pulse pressure,PP)分布情况作一流行病学调查,以了解PP在人群中的分布特点与规律,指导人们进行PP控制。同时分析PP与体重指数(body mass index,BMI)、腰臀比(waist-to-hipratio,WHR)的相关性,指导人们建立健康的生活方式、控制体重、保持正常体型、避免心血管病的风险。方法:采用2006年4~7月于河北
随着信息技术的飞速发展,新的技术手段应运而生,数字出版的概念日益成熟。如何利用网络、数字等这些先进的技术工具,推进出版行业的发展,开辟新的营销渠道,培育新的赢利模式,
图1的手表和图2的USB手环是否给我们带来一种完全不同的惊喜感受?这就是发散思维带给我们的一份厚礼.发散思维,顾名思义是指思维形态呈发散状的一种思维方式,即从一个基本点
裸燕麦是燕麦属中的独立种。皮、裸燕麦种间杂交后代表现混合遗传,其杂交技术为:严格选用种质资源;采用剪颖杂交技术;注重稳定前各世代的连续单株粒选;用生物学产量和收获指数作为
目的:通过分析35例晚期胃癌(advanced gastric carcinoma,AGC)患者,经过多西紫杉醇联合顺铂(DC)方案治疗后,多西紫杉醇(docetaxel,DTX)的药物浓度-时间曲线下面积(area under curve
活跃在图书市场上的出版社大多在特定领域具有优势,即使是规模较大的出版企业,也只在有限的几个领域能够施展自如。世界著名的出版企业,几乎都有自己固有的目标市场。如施普