新西兰兔结核性创面模型的构建及不同药物对创面愈合的影响

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结核性创面是结核分枝杆菌侵犯机体导致皮肤破溃发生的创面,发生后难以自愈,病程迁延,病程短则数月,长达数年,漫长的治疗周期给患者带来巨大的身心负担,严重降低患者的生活质量。如何促进结核性创面愈合成为临床治疗结核性创面的难点问题。动物模型是研究疾病发生、发展的基础,目前发现可形成结核性创面的动物有豚鼠、新西兰兔、斑马鱼等,但尚未建立可用于结核性创面治疗研究的成熟、稳定的动物模型。碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)作为一种多功能生长因子,广泛应用于压疮、糖尿病足、放射性溃疡等难愈性创面,对加速此类难愈性创面愈合有肯定的作用。而b FGF在结核性创面清创后的治疗中是否能取得良好的效果,国内外文献尚未见报道。已有外用抗结核药物用于结核性创面治疗的临床报道,但其具体效果及机制仍需进一步研究。为初步探讨b FGF和抗结核药物在结核性创面治疗中的作用及其可能机制,本研究在32只经完全弗氏佐剂致敏的新西兰兔两侧背部注射浓度5×107CFU/ml的BCG菌液,建立新西兰兔结核性创面模型。按随机数字表法将新西兰兔分为生长因子组(A组)、抗结核药物组(B组)、生长因子联合抗结核药物组(C组)、空白对照组(D组),每组8只。对创面进行彻底清创后,各组行相应药物治疗,隔日换药一次。于清创后即刻、7d、14d、21d、28d分别观察各组创面愈合情况,数码拍照计算创面愈合率,记录愈合时间;取创缘组织行HE染色、Masson染色进行组织学观察;行CD31染色计数创缘组织微血管数;ELISA法检测创缘羟脯氨酸水平。对数据行单因素方差分析、LSD-t检验。研究结果表明:(1)术后7d、14d、21d、28d,A组、B组、C组创面愈合率显著高于D组,且在14d、21d、28d时A组和C组创面愈合率显著高于B组。4组创面愈合时间分别为,A组29.50天±2.45天,B组31.63天±1.30天,C组28.13天±0.99天,D组35.63天±2.33天,A组、B组和C组创面愈合时间显著小于D组,P<0.05,A组和C组愈合时间显著小于B组,P<0.05,A组和C组间愈合时间比较差异无统计学意义。(2)术后21d组织切片HE染色和Masson染色观察,A组和C组创面组织结构完整,层次较为清晰,胶原纤维排列更加整齐(3)术后21d时4组创面微血管数分别为:A组31.63个±1.19个、B组27.53个±1.26个、C组32.84个±1.60个、D组22.30个±1.68个,A组、B组和C组显著高于D组,P<0.05,A组和C组明显高于B组,P<0.05。(4)在术后14d和21d时,A组、B组和C组羟脯氨酸水平显著高于D组,P<0.05,且A组和C组显著高于B组,P<0.05。以上结果提示:新西兰兔结核性创面模型可复制人类结核性创面的主要特征,可作为人类结核性创面研究的可靠动物模型;清创后局部应用抗结核药物可促进新西兰兔结核性创面的愈合,提高创面愈合质量;清创后局部单独应用成纤维细胞生长因子或联合抗结核药物,在缩短新西兰兔结核性创面愈合时间及提高创面愈合质量方面显著优于单独使用抗结核药物。
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