青蒿素诱导肿瘤细胞凋亡和T细胞活化机制的拉曼光谱研究

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拉曼光谱是一种分子散射振动谱,拉曼散射光携带有物质的组成成分、化学键以及分子结构等方面的信息,可以对物质进行定性和定量的研究。拉曼光谱技术因其无损、灵敏度高、方便高效等优点在单细胞探测水平得到广泛应用。肿瘤疾病是一直以来困扰着人们而难以治愈的疾病,探寻有效治疗肿瘤疾病又具有较小毒副作用的药物对肿瘤疾病的治疗有非常重要的意义。中药青蒿素具有抗肿瘤的作用,可以治疗肿瘤疾病的同时,对正常细胞无损伤。T细胞通过活化产生免疫反应,其效应功能依赖于细胞与细胞之间存在的的T细胞受体(TCR)的信号介导,探究T细胞的活化机制,对于增强人体免疫防御功能也具有非常重要的价值。  本文利用显微拉曼光谱技术对中药青蒿素诱导Raji肿瘤细胞凋亡和T细胞的活化机制进行实验探究,本论文的主要研究内容如下:  第一,利用拉曼光谱技术,对中药青蒿素诱导肿瘤Raji细胞凋亡的分子机制进行研究,运用主成分分析方法进行统计分析,并结合传统的荧光标记方法进行验证,结果表明:中药青蒿素确实具有抗肿瘤的作用,能够通过抑制血红蛋白的减少而使肿瘤细胞缺铁而凋亡,细胞的DNA、蛋白质、脂质以及碳水化合物等含量都发生改变;青蒿素诱导肿瘤细胞凋亡的触发机制很可能与1610、1625和1655cm-1处的蛋白质的变化有关;且凋亡效果和过程具有时间依赖性。  第二,通过研究分析T细胞活化前后拉曼光谱的差异,得到T细胞活化过程中的生化变化,以探究其活化机制,结果表明:T细胞在不同的刺激物的CD3/CD28复合体和PHA的刺激下,都发生活化,且CD3/CD28对T细胞的活化性能优于PHA;T细胞的活化机制可能与TCR的二级结构构成、DNA含量的减少以及一些特殊蛋白质含量的变化有关。结合原子力显微镜,活化的T细胞的形貌也发生变化,在表面产生突起。T细胞的活化程度越高,生化成分的变化程度越大,产生的突起越多。
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