三穗县鸭传染性浆膜炎调查及防治

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鸭传染性浆膜炎(Duck infectious serositis)又称鸭疫里默氏杆菌病(Riemerella anatipestifer infection),是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)感染雏鸭及其它禽类引起的一种以纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、干酪样输卵管炎和脑膜炎为特征的急性败血性传染病。该病具有较高的发病率和死亡率,严重威胁水禽养殖产业的健康发展。三穗县隶属黔东南州,具有丰富的水资源,是我国四大地方名鸭之一的三穗麻鸭的泽源地和主产区。在贵州省委、省政府,黔东南州委、州政府和当地县委、县政府的大力支持下,三穗县鸭养殖产业得到了蓬勃发展,当地除了大量养殖三穗麻鸭这一具有产蛋率高、耐粗饲、肉质细嫩、味美色鲜、胆固醇低等优点的地方优良畜禽品种之外,还主要饲养有花边鸭、金定鸭等优秀品种。随着鸭养殖规模不断扩大,当地鸭病问题亦日益突出,其中以鸭传染性浆膜炎最为常见。为掌握三穗县辖区内规模养鸭场鸭传染性浆膜炎的流行情况及防治方法,本研究开展了三穗县鸭传染性浆膜炎流行病学调查、病原分离鉴定和药物防治研究,以期为三穗县规模养鸭场鸭传染性浆膜炎的预防与控制提供科学依据。1.三穗县鸭传染性浆膜炎流行病学调查采用动物传染病流行病学调查方法,对2017~2019年3年间三穗县20个规模化养鸭场进行鸭传染性浆膜炎流行病学调查分析,结果显示:在饲养季节上,三穗县规模化肉鸭场和蛋鸭场一年四季均有发生鸭传染性浆膜炎,但呈明显的季节性,在春、冬两季多发,尤其以3月和11月发病最为严重,平均发病率分别达20.13(7.25万只/35.96万只)、18.58(6.68万只/35.96万只);在养殖模式上,全开放式养鸭场平均发病率较高,达27.78%(6万只/21.6万只),半开放式养鸭场平均发病率次之,达23.51%(23.26万只/98.9万只),网床式养鸭场平均发病率最低,只有18.5%(6.7万只/36.2万只);在饲养品种上,花边鸭(肉用型鸭)平均发病率最高30.43%(25.41万只/83.5万只),达,金定鸭(蛋肉兼用型)平均发病率次之,达16.94%(8.1万只/47.8万只),三穗鸭(蛋用型)平均发病率最低,只有9.65%(2.45万只/25.4万只);在发病日龄上,以6~15日龄雏鸭平均发病率最高,达58.9%(21.19万只/35.96万只),20~60日龄鸭平均发病率次之,达37.6%(11.58万只/35.96万只),60日龄以上鸭的平均发病率较低,仅为3.5%(1.26万只/35.96万只)。2.三穗县鸭传染性浆膜炎病原分离鉴定采集养鸭场鸭传染性浆膜炎疑似病例组织样本,采用细菌分离培养、生理生化鉴定、特异基因分析、动物回归试验、血清型鉴定和毒力基因检测等进行鸭传染性浆膜炎的分离鉴定,结果显示:30份鸭病料样本均可见细菌生长,分离的菌株在巧克力培养基上形成半透明、光滑圆形的滴状菌落,经革兰氏染色法染色为革兰氏阴性短小杆菌,瑞氏染色呈两极浓染;生化试验显示,分离菌能分解尿素,触酶和氧化酶试验阳性,不发酵葡萄糖、乳糖和蔗糖,不利用枸橼酸盐,不产生硫化氢;随机选取6株细菌分离物,采用细菌16S r RNA基因通用引物进行PCR扩增,均可得到大小约为1 450bp左右的DNA片段,DNA测序后与RA参考菌株进行序列比对,其同源性达98.6%~99.9%;将该6株细菌分离物分别接种雏鸭,接种雏鸭的临床症状与病理变化均符合鸭传染性浆膜炎典型特征,且能分离得到与原接种菌一致的细菌,综合培养特性、菌体特点、生化鉴定和动物回归试验结果,可以判定6株细菌分离物均为RA,分别命名为SS-RA1~6。取6株RA培养物送至四川农业大学禽病研究中心进行血清型鉴定,证实SS-RA1~4分离株为血清2型,SS-RA5~6为血清11型;以RA常见的8个毒力基因特异性引物进行PCR扩增,发现SS-RA1~4分离株均可得到相应的DNA片段(1 164 bp、1 026 bp、939 bp、585 bp、468 bp、729 bp、427 bp和999 bp),即均含有Omp A、CAMP、wza、AS87_04050、Fur、SIP、Tbd R1和lux E毒力基因,而SS-RA5~6分离株除AS87_04050毒力基因外,均可检出其它7个毒力基因。3.三穗县鸭传染性浆膜炎病原耐药性分析及药物治疗效果采用药敏纸片法对6株RA分离株进行药敏试验,结果显示:6株RA分离株对青霉素类药物(羧苄西林和哌拉西林)和头孢类药物(头孢他啶、头孢氨苄、头孢曲松、头孢拉定和头孢哌酮敏感,而对氨基糖苷类、四环素类、喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类和氯霉素类药物呈现较高耐药性;采用细菌常见耐药基因特异性引物进行PCR扩增,发现6株RA分离株均存在aac(6’)-Ib、oqx A、erm F、tet(X)、flo R和Int I1耐药基因,与上述药敏试验表型相符。根据药敏试验结果,选取头孢他啶、恩诺沙星和羧苄西林钠进行联合用药,连续用药5 d后鸭传染性浆膜炎发病鸭群基本恢复,有效降低了当地规模养鸭场鸭群的发病率和死亡率。综上所述,通过流行病学调查发现,三穗县规模化养鸭场鸭传染性浆膜炎一年四季均可发生,冬春季发病率较高,夏秋季低;当地饲养不同品种和不同生长阶段的鸭均可感染发病。通过发病鸭病原学分离培养鉴定,获得6株三穗地方流行的鸭疫里默氏杆菌,其中4株为血清2型,2株为血清11型并有基因缺失型。经药敏试验6株分离菌均对半合成青霉素类和头孢类药物敏感,对氨基糖苷类和四环素类等6种抗菌素耐药,同时检测出相应的耐药基因;应用敏感药物进行治疗,能取得良好的治疗效果。
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