番木瓜环斑病毒株系的分子生物学鉴定

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该文以P1/P2为引物,采用RT-PCR方法合成了该病毒室保存的番木瓜畸叶病毒的外壳蛋白(Coat protein,CP)基因,将其CP基因克隆进Promega公司的pGEM-T and pGEM-T Easy Vector System(简科T-载体),并进行了序列分析.采用DAS-ELISA和RT-PCR方法对分别采自云南、海南、广州的24、13和17个样品进行检测,都未发现日本的番木瓜哿型花叶病毒.用限制性内切酶aell、Sau3Al和Hinfl对PRSV的PRSV126、Ys、PMaLV和Sm等株系进行单酶切RT-PCR-RFLP分析.以P1/P2为引物,对PMaLV、Ys和Sm侏系进行RT-PCR-RFLP-SSCP分析,结果能一次把三者较好地区别开来.用已建立的特异性引物RT-PCR和单酶切RT-PCR-RFLP鉴 定方法对侵染PRSV Ys CP基因番木瓜、海南番木瓜样品以及发生于广州磨蝶沙果场的严重畸形叶症番木瓜中的毒原进行初步鉴定.
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