【摘 要】
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脂肪肝是奶牛围产期一种常见的代谢性疾病。围产期奶牛经历严重的能量负平衡(Negative energy balance,NEB),机体动员脂肪组织以满足能量需求。这种动员常常导致血液中非酯化脂肪酸(Non-esterified fatty acid,NEFA)浓度增加,NEFA被肝脏吸收、再酯化为甘油三酯(Triacylglycerol,TAG)并在肝脏中积累,从而导致脂肪肝的发生。脂肪肝多发生于
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脂肪肝是奶牛围产期一种常见的代谢性疾病。围产期奶牛经历严重的能量负平衡（Negative energy balance,NEB）,机体动员脂肪组织以满足能量需求。这种动员常常导致血液中非酯化脂肪酸（Non-esterified fatty acid,NEFA）浓度增加,NEFA被肝脏吸收、再酯化为甘油三酯（Triacylglycerol,TAG）并在肝脏中积累,从而导致脂肪肝的发生。脂肪肝多发生于泌乳初期的高产奶牛,可引起奶牛产奶量下降,并诱发其他疾病,造成奶牛过早淘汰甚至死亡,严重制约了我国奶牛业发展。目前确诊奶牛脂肪肝唯一可靠的方法是肝活检,但该方法对操作者有较高的技术要求且会损害奶牛肝脏,存在高概率的感染风险。监测尿液、乳和血液中的某些成分,用以评价畜群、个体的营养状态,进而预警营养代谢性疾病的方法已得到广泛认可,即“凯谱顿代谢谱”。因此,本研究通过比较与分析健康奶牛和脂肪肝奶牛血液中能量代谢相关指标、肝功能及肾功能相关指标、免疫学相关指标以及矿物元素和骨胶原代谢相关指标,寻找便于诊断奶牛脂肪肝的关键指标,并评价其敏感性和特异性,确定Cut-point值,以期有效早期预警奶牛脂肪肝的发生。本研究以30头健康奶牛和30头脂肪肝奶牛为实验对象,评价其血液代谢谱的变化。检测血液中载脂蛋白B100（Apolipoprotein B100,ApoB100）、胰高血糖素（Glucagon,GC）和葡萄糖（Glucose,Glu）等11个能量代谢相关指标;丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（Aspartate aminotransferase,AST）和γ-谷氨酰转肽酶（γ-glutamyl transpeptidase,GGT）等13个肝功能及肾功能相关指标;白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素8（IL-8）等11个免疫学相关指标;Ca、Mg和Zn等5个矿物元素指标以及骨保护素（Osteoproterin,OPG）、羟脯氨酸（Hydroxyproline,HYP）和降钙素（Calcitonin,CT）等5个骨胶原代谢相关指标。利用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC曲线）分析各指标曲线下面积（area under the curve,AUC）、敏感度（sensitivity,Se）和特异度（specificity,Sp）及相对应检测指标的Cut-point值,以此比较相关指标在诊断奶牛脂肪肝中的效用,筛选出可有效用于早期预警奶牛脂肪肝的指标。结果表明,脂肪肝奶牛普遍存在NEB和Ca2+负平衡,胰岛素（Insulin,INS）敏感性降低,胆红素代谢障碍,以及严重的炎症反应和肝损伤。利用ROC曲线分析结果显示ApoB100（AUC=0.993,Se=0.97,Sp=0.97,Cut-point=353（μg/mL））、GC（AUC=0.979,Se=0.97,Sp=0.90,Cut-point=47.92（ng/mL））、ALT（AUC=0.978,Se=0.97,Sp=0.90,Cut-point=22.1（U/L））、GGT（AUC=0.976,Se=0.90,Sp=0.97,Cut-point=38.2（U/L））、IL-1（AUC=0.976,Se=0.93,Sp=0.93,Cut-point=99（ng/L））、IL-6（AUC=0.975,Se=0.90,Sp=0.97,Cut-point=12.9（ng/L））和IL-8（AUC=0.986,Se=0.93,Sp=0.93,Cut-point=414（ng/L））可作为诊断以及早期预警奶牛脂肪肝的首选指标。TAG、总胆固醇（Total cholesterol,TC）、极低密度脂蛋白（Very low-density lipoprotein,VLDL）、载脂蛋白E（Apolipoprotein E,Apo E）等可作为诊断及早期预警奶牛脂肪肝的辅助指标。这些奶牛脂肪肝早期群体预警首选指标和辅助指标的敏感性、特异性和阈值的确定,为研发基于“互联网+”的奶牛脂肪肝预警系统奠定了理论基础。
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