【摘 要】
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该研究采用RT-PCR方法,从人胚肺成纤维细胞中克隆出了角质细胞生长因子(Keratinocyte Growth Factor,KGF)的蛋白编码区基因,全长582bp.经酶切鉴定和序列测定分析,克隆片段与
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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该研究采用RT-PCR方法,从人胚肺成纤维细胞中克隆出了角质细胞生长因子(Keratinocyte Growth Factor,KGF)的蛋白编码区基因,全长582bp.经酶切鉴定和序列测定分析,克隆片段与文献报道的人角质细胞生长因子cDNA序列完全一致.通过用MTT法测定KGF对小鼠肠上皮细胞IEC-6的活性,结果表明KGF对IEC-6细胞有刺激增殖作用,提示KGF很可能成为治疗肠道辐射损伤的细胞因子.为了实现KGF的大量表达,进一步将KGF基因分别插入大肠杆菌表达载体pBV220、pGEX-KG和pBV220-IL1中,并用各自的表达条件促其表达,但三者的表达效果均不够理想.利用蛋白三维分析软件分析KGF全长,及其去除信号肽后的蛋白结构,结果表明二者的结构基本相同,并且信号肽对KGF的结构影响不大.由于带有信号肽的KGF在大肠肝菌中的表达量较高,因此,如果带有信号肽的全长KGF能作为重组KGF的替代品,其应用前景是相当可观的.
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