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目的： 2型糖尿病(Type2 diabetes,T2DM)是一种多基因遗传性的疾病，占糖尿病总人数的80％以上。艾塞那肽能够以葡萄糖依赖的方式控制血糖、刺激胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌、延缓胃排空、减轻体重，同时降低低血糖发生的危险，适用于治疗2型糖尿病。但是艾塞那肽在体内的半衰期短，其注射剂需要每天注射两次，频繁给药使其注射剂的应用受到极大的限制。虽然艾塞那肽微球的作用时间明显延长，但是仍有必要研发顺应性更好的制剂。 本课题旨在采用乳酸对艾塞那肽进行酰化修饰，乳酸小分子利于注射给药后多肽与血浆蛋白的物理结合，从而延长药物的体内半衰期；同时，将酰化修饰后的乳酸-艾塞那肽酰化物包载于PLGA高分子材料中制备成长效缓释微球制剂，在体内缓慢释放，减少给药次数，提高患者的顺应性。 方法： 1、采用乳酸酰化艾塞那肽生成酰化产物，分别用高效液相色谱和质谱对酰化产物进行分离、鉴定。采用大鼠考察艾塞那肽连接一个乳酸的酰化物（LA-M1）的体内药代动力学。以db/db小鼠为模型动物考察LA-M1的体内药效学，同时进行小鼠的IPGTT实验考察。 2、采用乳化-溶剂挥发法制备LA-M1微球，摇床法考察LA-M1微球的体外释放曲线。并分别以SD大鼠和db/db小鼠为模型动物考察LA-M1微球的体内药代动力学特征及药效学特征。 3、采用MTT法测定LA-M1对RIN-m5f细胞的促进细胞增殖的作用。 结果: 1、合成得到了连接不同数量乳酸的艾塞那肽酰化物，用质谱对其进行表征，四个色谱峰根据保留时间的延长依次为连接一个乳酸的艾塞那肽酰化物、连接两个乳酸的艾塞那肽酰化物、不同位置的连接两个乳酸的艾塞那肽酰化物、连接四个乳酸的艾塞那肽酰化物。制备液相分离连接一个乳酸的艾塞那肽酰化物LA-M1。大鼠体内的药动学结果显示，LA-M1在体内2 h达到最大血药浓度，半衰期t1/2为5.948 h，显著长于艾塞那肽的半衰期（t1/2为2.588 h）。注射LA-M1后，糖尿病小鼠的血糖值显著下降，具有明显的降血糖效果。 2、制备LA-M1微球，结果显示：实验中通过对不同处方的筛选，选择出最优处方：制备方法选择单乳化-溶剂挥发法，高分子材料为PLGA75252A，PVA浓度为1%，油相：水相体积比1.5:100，均质速度1500 rpm，制备的微球，球形圆整，表面光滑，载药量为4.72%，包封率为94.4%。体外释放结果显示，LA-M1微球具有良好的缓释效果，能够在体外缓慢释放约40天。体内药动学研究结果显示，LA-M1微球能够在大鼠体内缓慢释放近30天，长于艾塞那肽微球的20天的体内释放时间。药效学研究结果显示LA-M1微球的体内降血糖作用与艾塞那肽微球相似，明显低于生理盐水组的血糖值，同时对小鼠降低血糖的作用时间长于艾塞那肽微球。而且，不同剂量的LA-M1微球在体内的作用时间有不同的影响，随着剂量的增加，LA-M1微球的体内作用时间延长。 3、实验采用大鼠胰岛瘤RIN-m5f细胞考察LA-M1对胰岛细胞的作用，采用MTT法测定LA-M1对RIN-m5f细胞的促进细胞增殖的作用，实验中我们以细胞的存活率为指标，结果显示LA-M1具有促进胰岛瘤细胞增殖的作用，其作用类似于艾塞那肽，这种促进细胞增殖的作用在一定范围内随着LA-M1浓度的增大而增加，具有时间和剂量依赖性。 结论： 1、合成并分离的艾塞那肽单乳酸酰化物LA-M1在体内半衰期长于艾塞那肽；LA-M1在体内具有降血糖作用。 2、LA-M1微球在体内的作用时间长于艾塞那肽微球，降血糖作用效果显著，并且具有剂量依赖性。 3、LA-M1能促进胰岛瘤细胞增殖。 研究创新点： 本课题首次同时采用酰化修饰联合微球长效制剂方式实现艾塞那肽的长效性，延长艾塞那肽在体内的作用时间，降低频繁给药给患者带来的痛苦。采用乳酸对艾塞那肽进行酰化修饰，乳酸小分子利于注射给药后多肽与血浆蛋白的物理结合，延长药物的体内半衰期；将酰化修饰后的乳酸-艾塞那肽酰化物包载于PLGA高分子材料中制备成微球制剂，体内可实现30 d的释放周期，缓释时间明显长于艾塞那肽微球，减少了给药次数，提高了患者的顺应性。