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胆汁中的33.5kDa泡相蛋白 (33.5kDa vesicular protein) 是1998年由马保金等人从胆固醇结石患者胆汁中分离纯化出的。其蛋白浓度为0.46±0.06mg/ml，约占胆汁总蛋白量的0.552﹪。尽管33.5kDa泡蛋白含量甚微，却具有显著的促成核作用，通过测定得出成核活性强达0.310，是迄今发现活性最强的成核效应蛋白。寻找最强促成核活性蛋白，可用于研制诊断试剂盒判断和预测胆石发生、发展趋势。
本实验采用了高速离心、离子交换层析、分子筛层析等方法，来寻找一条快速方便经济的分离纯化胆汁中33．5kDa泡相蛋白的方法。在此基础上可以利用纯化的33.5kDa泡相蛋白制备单克隆抗体从而利用EIASA的原理制成胶体金快速诊断试剂盒用来检测蛋白作为普查诊断的标准。
实验首先采用了离子交换层析，尝试了阴离子、阳离子两种填料，经过四个pH条件的摸索得出目的蛋白应为酸性蛋白，对离子交换层析填料吸附性强，难于洗脱。之后，采用Phenvl-Sepharose Fast Flow，由于胆汁中胆红素可能疏水性更强，从而目的蛋白不能够有效的挂在填料上，而且对填料的损坏也很严重。最后通过高速离心结合分子筛层析的方法得到了电泳纯的蛋白样品，利用得到的蛋白样品进行了模拟胆汁成核的活性测定，实验结果说明分离到的蛋白有成核活性，经RP-HPLC进行纯度鉴定，目的蛋白纯度基本可以。还需进一步实验分析样品是否是我们的目的蛋白。