【摘 要】
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肿瘤坏死因子(TNFa)是一种具有多种生物学活性和病理活性的细胞因子,在多种疾病包括败血症休克、类风湿关节炎、移植物抗宿主反应、Crohns病等疾病的发生发展中起着 十分重要
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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肿瘤坏死因子(TNFa)是一种具有多种生物学活性和病理活性的细胞因子,在多种疾病包括败血症休克、类风湿关节炎、移植物抗宿主反应、Crohns病等疾病的发生发展中起着 十分重要的作用.抗TNFa单克隆抗体能够特异性地中和TNFa的活性,因此在上述疾病的治疗中有广泛的应用前景.由于常规技术生产的鼠单抗在应用于人体时存在局限性,制备人源抗TNFa单克隆抗体一直是人们努力追求的方向.近年来发展起来的噬菌体抗体技术为制备人源抗TNFa单克隆抗体开辟了一个新的途径.作者采用噬菌体抗体技术,从混合的噬菌体抗体库(HIV HAV 和HBV)中筛选了与TNFa有高亲和力的人源抗TNFa抗体,并以筛选到的抗体重链为 基础,另外构建了一个含有单一的人源抗TNFa抗体重链基因的人全套抗体轻链库,从中筛选到了与TNFa有更高亲和力的噬菌体抗体.作者对筛选到的噬菌体抗体进行了鉴定,并对重链和轻链基因进行了序列分析.并通过基因重组技术在大肠杆菌中表达和纯化了抗体的重链和Fab片段.作者还用基因工程的方法将人源抗TNFa抗体和人源抗LPS抗体的重链基因进行了直中接偶联,并在大肠村菌中表达和纯化了这种抗TNFa-LPS双重链抗体.最后作者还对纯化的抗TNFa抗体的重链和Fab以及抗TNFa-LPS双重链抗体在体内和体外的生物学活性进行了初步 检测.
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