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第一部分
目的：DLK1在肝脏的发育和肝癌的发生发展中起着重要的作用，有文献提示，小鼠胎肝中DLK1+的细胞具有更强的增殖能力，可以分化成肝细胞，但是人类肝癌中的DLK1+细胞具有什么样的特性，并不清楚，本研究主要探讨人类肝癌中DLK1+细胞的生物学行为，并探索针对其进行基因治疗的可能性。
方法：采用RT-PCR、real-time PCR、流式细胞术检测肝癌细胞株中DLK1的表达情况；化疗药物处理细胞后，real-time PCR和流式细胞术检测DLK1的表达情况；流式细胞分选或者免疫磁珠分选DLK1+和DLK1-细胞；采用流式细胞术研究其体内外自我更新能力；采用克隆形成、小鼠皮下成瘤实验研究其体内外成瘤能力；重组腺病毒介导的RNAi下调DLK1表达后观察迁移能力、重组基底膜侵袭能力、生长增殖能力、克隆形成能力和裸鼠皮下成瘤能力。
结果：肝癌细胞系中存在着DLK1+细胞亚群，比例从0.19％到10.22％不等。与DLK1-细胞相比，DLK1+细胞在体外具有更强的克隆形成能力，在体内具有更强的成瘤性；体内外实验还发现，DLK1+细胞具有自我更新能力；与DLK1-细胞相比，DLK1+细胞对化疗药物更具有耐受性。下调DLK1后可能抑制Hep3B的侵袭和迁移能力。重组腺病毒载体介导的DLK1下调可以抑制肝癌细胞系Huh7和Hep3B的生长和克隆形成能力，抑制Huh7细胞在裸鼠皮下的成瘤能力，提示DLK1可能可以作为一个基因治疗的靶点。
结论：DLK1+细胞可能具有某些肿瘤干细胞的特性，如耐药性，少量细胞成瘤能力，自我更新能力，另外，DLK1可能与某些细胞的侵袭迁移有关，为HCC的发病机制研究提供了新的线索，腺病毒介导的RNAi下调DLK1表达后，在裸鼠皮下成瘤能力下降，提示DLK1可能可以作为一个肝癌基因治疗的靶点。
第二部分
目的：本实验室前期通过大批量芯片筛选，粗筛发现一个人类新基因FAM43B在肝癌中表达下调，本实验初步探讨FAM43B基因的生物学功能以及与肝癌发生发展的关系。
方法：采用RT-PCR及real-time PCR技术分析FAM43B在肝癌组织和癌旁组织中的表达；采用real-time PCR技术分析FAM43B在正常组织及肝癌细胞株中的表达谱；构建FAM43B的真核表达载体；免疫荧光定位技术分析FAM43B的亚细胞定位；生长曲线和克隆形成实验分析FAM43B的过表达以及干扰下调后对肝癌细胞生长、克隆形成能力的影响；采用免疫沉淀结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析FAM43B可能的相互作用蛋白。
结果：FAM43B在85％的肝癌样本中的表达明显低于相应的癌旁组织；在细胞株内经DAC和TSA处理后FAM43B的表达明显升高；FAM43B定位在Hep3B和LM3细胞核内，FAM43B在大脑、心脏、肾脏、胰腺、肝脏中表达较高，在胎肝中基本不表达。在其他组织中表达量很低；FAM43B过表达可以抑制肝癌细胞株Hep3B和Focus的生长和克隆形成，被干扰下调以后可以促进Be17404和QGY7703细胞的生长；免疫沉淀结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析得到三个可能的相互作用蛋白HNRNPA2B1、TPM3和MRPL4。
结论：FAM43B的表达下调在肝癌发生发展过程中具有重要作用，多种实验证据提示FAM43B具有某些抑癌基因的特点和功能，可能是一个候选的抑癌基因。其更多的功能和作用机制还需要进一步研究。