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目的通过研究γ-氨基丁酸(GABA)对鸡下丘脑原代神经元细胞和鸡下丘脑采食相关基因表达调控的影响,探究GABA调节采食量的作用途径,揭示鸡饲粮中添加GABA改善生产性能的作用机制。方法本实验所用雏鸡、种蛋和种蛋孵化条件均由锦州医科大学家禽养殖团队提供。大骨鸡种蛋孵化14~16 d,取发育良好的胚蛋,取下丘脑,分离神经元细胞进行原代细胞体外培养。培养液中添加0、0.02、0.2、2 mg/m L GABA,分别在39℃(正常温度)和40.5℃(高温处理)下培养4h,分离出细胞,用Real-time PCR方法检测NPY、Ag Rp、GABAA-α1、MC4R和POMC m RNA表达量。将120只21日龄大骨鸡分成4组,每组3个重复,每重复10只。每处理组分别饲喂基础饲粮中添加0、5、50、500 mg/kg GABA的饲粮,试验期2周。测定体重、采食量,计算平均日增重和料重比。用SPSS软件进行统计分析。结果1、39℃培养的下丘脑神经元原代细胞,与对照相比,NPY、Ag Rp、GABAA-α1、MC4R和POMC m RNA表达量均极显著提高(P<0.01);GABAA-α1、Ag Rp和MC4R m RNA表达量在0.2 mg/m L GABA水平下最高,而NPY和POMC m RNA表达量在0.02 mg/m L GABA水平下最高。2、40.5℃培养的下丘脑神经元原代细胞,与对照相比,GABAA-α1和POMC m RNA表达量在0.02 mg/m L GABA水平下极显著升高(P<0.01),在0.2 mg/m L GABA水平下极显著降低(P<0.01),分别降低至显著低于对照或接近对照。与对照相比,除添加2 mg/m L GABA水平POMC和MC4R m RNA表达量接近对照组外,添加GABA使NPY、Ag Rp和GABAA-α1 m RNA表达量极显著降低(P<0.01)。3、饲粮中添加5和50 mg/kg GABA,与对照组相比,极显著提高了平均日增重和平均日采食量(P<0.01),但料重比也显著提高(P<0.01);添加500 mg/kg GABA,ADG极显著低于对照组(P<0.01),ADFI和料重比极显著提高(P<0.01)。饲粮中添加50 mg/kg GABA,公母鸡下丘脑GABAA-α1 m RNA表达量低于对照组(P>0.05);公鸡Ag Rp和POMC m RNA极显著低于对照组(P<0.01),而母鸡则无显著差异(P>0.05);公母鸡下丘脑NPY m RNA分别高于和低于对照组,但均无显著差异(P>0.05);公母鸡下丘脑MC4R m RNA表达量极显著高于对照组(P<0.01)。结论1、饲粮中添加适量的GABA能提高鸡的采食量和促进增重,过高则产生副作用。2、GABA在正常温度和高温下均调控下丘脑NPY、Ag RP、MC4R、POMC、GABAA-α1 m RNA表达,公母性别之间、体内和体外之间存在差异。3、饲粮中添加GABA提高鸡的采食量,其机制为调控下丘脑采食量相关基因表达。