【摘 要】
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食管癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一。近年来,随着现代分子生物学和基因工程技术的飞速发展,人们逐渐认识到肿瘤的侵袭和转移是一个复杂的多因素,多步骤的过程。肿瘤的侵袭
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食管癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一。近年来,随着现代分子生物学和基因工程技术的飞速发展,人们逐渐认识到肿瘤的侵袭和转移是一个复杂的多因素,多步骤的过程。肿瘤的侵袭性生长,转移和预后依赖于血管的生成。PDECGF是血管内皮生长因子家族成员之一。本实验采用RNA干扰技术,针对PDECGF基因进行siRNA质粒设计与构建,转染食管癌细胞。抑制食管癌细胞中血小板源性血管内皮生长因子(PDECGF)基因的转录表达。观察其能否特异性沉寂PDECGF基因,阻断食管癌细胞中PDECGF的自分泌和/或旁分通路后,观察肿瘤增生、转移等生物学功能变化,并探讨其对食管癌细胞生长和增殖的抑制效果,探讨PDECGF在食管癌发病过程中发挥的作用,并为将来的临床治疗食管癌提供新的希望。用MT法检测各组细胞增殖情况,采用RT PCR,western bloting检测转染前后各组细胞中PDECGF -mRNA和PDECGF蛋白的表达;琼脂糖凝胶电泳检测细胞染色体DNA断裂;软琼脂集落形成实验计算细胞增殖指数及集落形成率。结果提示:RNA干扰载体pPDECGF RNAi对食管癌细胞中PDECGF基因、蛋白表达可以产生明显抑制作用。RNA干扰载体pPDECGF RNAi对体外食管癌细胞的增殖有抑制作用。
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