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目的:本实验通过建立脊神经结扎（SNL）大鼠模型,观察建立模型后各组大鼠的机械痛阈和热痛阈变化,检测脊髓背角自噬相关蛋白表达及炎症因子IL-1β表达,并通过调节自噬探讨探索推拿镇痛机制。从分子水平探讨推拿对神经病理性疼痛的镇痛机制,以期为推拿镇痛提供科学理论依据。方法:以SPF级SD雄性大鼠共180只为研究对象。（1）将90只大鼠运用随机数字表法分为3组,空白对照组、假手术组、模型组,各组30只,空白对照组不予处理,模型组参照Kim等[34]脊神经结扎法,建立SNL鼠模型,假手术组仅暴露脊神经不予结扎。在造模前1d及造模后1、3、5、7d各时间点测定各组大鼠热痛阈值（PWL）和机械痛阈值（PWT）。各组于造模后第1、3、5、7d分别取6只采用Western blot法及免疫荧光法观察各组大鼠脊髓背角自噬因子P62、LC3的表达变化,造模后第7d各组取6只采用免疫荧光法观察P62与神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的位置关系。（2）另外,将90只大鼠运用随机数字表达法分为空白对照组、假手术组、模型组、雷帕霉素组、三甲基腺嘌呤组、推拿组,各组15只。空白对照组不作任何处理,假手术组暴露脊神经不予结扎,其余各组大鼠鞘内置管成功后建立SNL大鼠模型。建模成功后雷帕霉素组鞘内给予10μl自噬诱导剂雷帕霉素（Rap）;三甲基腺嘌呤组鞘内给予10μl自噬抑制剂三甲基腺嘌呤（3-MA）,其余各组给予等剂量的5%DMSO,同时推拿组采用按摩推拿手法模拟仪每天推拿一次,各组连续干预7d。在造模前1d及造模后1、3、5、7d各时间点测定各组大鼠PWL和PWT。采用Western blot法观察各组大鼠脊髓背角自噬因子P62、LC3的表达变化,ELISA法测定大鼠血清IL-1β表达。结果:1.一般情况:（1）空白对照组各亚组大鼠精神好,皮毛光泽,肢体活动自如。假手术组各亚组大鼠皮毛色泽光亮、致密均匀,手术缝合口愈合良好,大鼠体重平均每天增重4-9g。模型组术后第5天,大鼠精神差,皮毛无光泽,手术缝合口不同程度咬开,严重大鼠术口出现溃疡面,行走时出现跛行加重,进食、摄水较前减少,大便稀烂,气味臭,开始出现死亡。（2）空白对照组、假手术组、模型组基本同前;雷帕霉素组大鼠于造模后第3d一般情况逐渐平稳并好转,三甲基腺嘌呤组大鼠于造模后第3d开始一般情况较模型组差,大鼠自残行为更为显著;推拿组于造模后第5d开始一般情况逐渐平稳,自残行为停止。2.PWL及PWT结果:各组大鼠在造模前其患肢PWL和PWT差异无统计学意义（P>0.05）。（1）造模后第1d,模型组其患肢PWL及PWT较空白对照组及假手术组明显降低（P<0.05）,提示有热痛及机械痛敏化;且模型组PWL及PWT持续降低至造模后第7d（P<0.05）。（2）与模型组相比,雷帕霉素组在造模后第1、3、5、7d PWL、PWT显著性升高（P<0.05）,有统计学意义,而三甲基腺嘌呤组在造模后第5、7d PWL、PWT显著性降低（P<0.05）,具有统计学意义,而推拿组造模后第5d PWL、PWT显著性提高（P<0.05）,差异有统计学意义。造模后第7d,空白对照组、假手术组与模型组、雷帕霉素组、三甲基腺嘌呤组、推拿组大鼠之间PWL、PWT差异有统计学意义（P<0.05）。3.Western blot法结果:（1）与空白对照组、假手术组相比较,造模后第1d,模型组大鼠脊髓背角LC3-Ⅱ表达较高（P<0.05）,而P62蛋白表达较低（P<0.05）,之后LC3-Ⅱ表达逐渐下降,P62表达逐渐升高。与正常组及假手术组比较,模型组的P62及LC3-Ⅱ表达均明显升高（P<0.05）。（2）空白对照组、假手术组与模型组、雷帕霉素组、三甲基腺嘌呤组大鼠之间P62蛋白的表达的差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比,雷帕霉素组P62蛋白的表达显著性降低（P<0.05）,有统计学意义,而三甲基腺嘌呤组P62蛋白的表达显著性升高（P<0.05）,具有统计学意义,而推拿组P62蛋白的表达显著性提高（P<0.05）,差异有统计学意义。空白对照组、假手术组与模型组、雷帕霉素组、三甲基腺嘌呤组、推拿组大鼠之间LC3蛋白的表达的差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比,雷帕霉素组、推拿组LC3蛋白的表达显著性升高（P<0.05）,有统计学意义,而三甲基腺嘌呤组LC3蛋白的表达显著性降低（P<0.05）,具有统计学意义。4.免疫荧光法结果:空白对照组、假手术组、模型组大鼠P62在造模后7d内与星形胶质细胞标记物GFAP未呈共表达状态。5.ELLSA法结果:空白对照组、假手术组与模型组、雷帕霉素组、三甲基腺嘌呤组、推拿组比较均有显著性差异（P<0.05）,可认为模型组、雷帕霉素组、三甲基腺嘌呤组和推拿组的炎症因子IL-1β表达水平高于假手术组及空白对照组;模型组和推拿组比较有显著性差异（P<0.05）。结论:（1）自噬跟神经病理性疼痛有关,当自噬发生时,脊髓背角P62及LC3的表达均抬高,且自噬与时间有相关性。（2）星形胶质细胞未参与SNL模型7d内自噬反应过程。（3）推拿可缓解神经病理性疼痛,其机制可能与上调自噬,抑制炎症反应,发挥镇痛作用有关。