ADAM17过表达对MCF-7乳腺癌细胞迁移力和侵袭力的影响

来源 :华北理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sdbradycn
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:利用LV8N-ADAM17转染人MCF-7乳腺癌细胞,观察基因ADAM17被稳定表达上调之后对人MCF-7乳腺癌细胞迁移和侵袭力的影响。  方法:常规培养人MCF-7乳腺癌细胞。用携有红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)框架的慢病毒载体LV8N-ADAM17转染入人MCF-7乳腺癌细胞,转染后第24h更换新培养液,96h后利用荧光倒置显微镜观察RFP在MCF-7细胞中的表达状况。本实验分三组:转染组(转染过表达慢病毒载体的MCF-7细胞)、无义序列组(转染无义序列的MCF-7细胞)和对照组(未做转染处理的MCF-7细胞)。转染成功之后,real-time PCR法检测三组乳腺癌细胞中ADAM17、EGFR mRNA的表达情况;Western blot法检测三组乳腺癌细胞内ADAM17、EGFR蛋白表达情况;Transwell实验检测三组乳腺癌细胞的侵袭能力;细胞划痕实验检测三组乳腺癌细胞的运动迁移能力。  结果:1设置感染复数(multiplicity of infection,MOI)约为100,转染96h以后,于荧光倒置显微镜下观察,转染效率几乎达到100%。2real-time PCR检测结果为,ADAM17mRNA在转染组的表达量为1.79±0.08,无义序列组的表达量为1.16±0.07,对照组的表达量为1.13±0.05。EGFR mRNA在转染组的表达量为1.72±0.15,无义序列组的表达量为1.21±0.04,对照组的表达量为1.17±0.09。转染组ADAM17、EGFR mRNA表达量明显高于对照组、无义序列组,差异显著(P<0.05)。3Western blot检测结果显示,ADAM17蛋白在转染组、无义序列组、对照组的表达量分别为0.81±0.07、0.52±0.04、0.50±0.02。EGFR蛋白在转染组、无义序列组、对照组的表达量分别为1.43±0.24、0.86±0.06、0.88±0.17。转染组中ADAM17、EGFR蛋白的表达均明显高于无义序列组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。4Transwell侵袭实验结果显示,转染组、无义序列组、对照组的穿膜细胞数分别为101.00±6.19个/视野、76.35±6.41个/视野、79.20±10.04个/视野。转染组乳癌细胞侵袭力明显高于对照组、无义序列组,差异有统计学意义(P<0.05)。5细胞划痕实验检测结果表明,转染组、无义序列组、对照组划痕愈合率分别为70.67%±9.01%、37.00%±2.65%、39.00%±4.58%,转染组划痕愈合率明显高于对照组、无义序列组,差异有统计学意义(P<0.05)。  结论:用携带ADAM17的慢病毒转染人MCF-7乳腺癌细胞,能显著上调乳腺癌细胞ADAM17的表达,并可显著增强其迁移和侵袭能力。
其他文献
期刊
平安校园建设是构建社会主义和谐社会的重要内容,高职院校班主任是学生大学生活中最直接密切的教育者和引导者,承担着基础的学生管理工作,本文从五个方面论述了高职院校班主
安格尔崇尚自然,由此而崇尚古典,肯定理智,进而重视线条;他认为美在自然,真实性是艺术美的基础,由于他心目中的美只限于优美,因此其艺术批评存在着一定的偏见。安格尔并不认
说起教材,传统的教学中我们通常会狭义地理解为教科书,就是一本本老师和学生进行对话的载体,教师可以据此照本宣科地进行传道、授业、解惑.而现在最普遍的广义的说法是,教材
融媒体是指广播、电视、报纸等传统媒体充分利用各种媒介载体进行信息、人才、传播等方面的全面整合,实现“资源通融、内容兼融、宣传互融、利益共融”的新型媒体形态.根据我
高一是化学学习的一个关键时期,不少学生在初中是学习的佼佼者,但在高一阶段却落伍了,这就提醒每一个有责任心的高中教师应对此引起足够重视,并积极地研究相应策略,笔者对学
基于社会发展新形势,电视台新闻记者要及时转变自身工作理念,正确认识到提升自身采访工作应变能力的重要性.灵活应变技巧方式应用作为电视台新闻记者采访过程的重中之重,是一
古希腊哲学家普鲁塔戈早在3000年前就讲过:“头脑不是一个要被填满的容器,而是一个需要被点燃的火把。”学校的教学与活动是要通过老师和学生的的相互作用来实现的,而真正的
高职类学生因其自身特点需要另辟蹊径的教学方式。导入作为课堂教学的第一步,尤其无法替代的必要性和重要性。结合教学实践,讨论了常见的三种导入模式 Higher vocational st
随着中国的不断发展,英语越来越受到人们的重视,而作为学习英语的重要场所——英语课堂,提高其效率,势在必行。 With the continuous development of China, English is gai