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目的：建立一种结核分枝杆菌的双重PCR检测方法；探讨乳液在牛结核病检测中的应用价值；利用PCR方法和PhaB法以及细菌分离培养法，对模拟样本和临床样本进行检测，探讨各种方法的临床应用价值，为建立牛结核病快速诊断方法奠定基础。
方法：以牛分枝杆菌标准菌株，建立一种PCR扩增方法；研究PhaB法检测模拟鼻拭子样本中牛分枝杆菌的灵敏度；利用模拟乳样建立乳样的PCR和PhaB检测方法；将PCR法、PhaB法和细菌分离培养法应用于临床样本的检测。
结果：建立了一种分枝杆菌的双重PCR检测方法，NTM菌株扩增片段长度在361bp～383bp之间，MTC菌株扩增出两条目的带，长度分别为368bp和225bp，灵敏度为大于等于10-6mg/mL的菌含量，检测时间为5h。PhaB法检测模拟鼻拭子样本的灵敏度为牛分枝杆菌活菌含量为50～500条/mL，24h内可判读结果。模拟乳样检测可得阳性结果。对206份临床样本进行检测，结果PCR扩增阳性3份，均为PPD阳性样本；PhaB法检测结果全为阴性；从一份PCR和PPD同为阳性的样本中分离到一株分枝杆菌，菌型鉴定结果为结核分枝杆菌，对该分离株进行PhaB法和PCR法检测结果均为阳性。
结论：所建立的双重PCR检测方法，特异性好，为结核分枝杆菌的快速检测提供了一可供选择的手段；相比之下，PhaB法检测所用时间较长，但可以直接检测样本中活菌的存在，结果更加可靠；乳液可用于牛结核病的诊断；应用于临床检测，PCR和PhaB法的灵敏度还有待进一步提高。