【摘 要】
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MicroRNA(miRNA)是一类长度约为22nt的非编码RNA，在动物、植物以及病毒中均有存在，广泛参与调节细胞增殖、凋亡、分化等生命过程。目前发现约一半的人类基因受miRNA调控，一些重
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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MicroRNA(miRNA)是一类长度约为22nt的非编码RNA，在动物、植物以及病毒中均有存在，广泛参与调节细胞增殖、凋亡、分化等生命过程。目前发现约一半的人类基因受miRNA调控，一些重大疾病，如肿瘤等，与miRNA的异常表达有关。本实验室利用RT-qPCR方法比较了29个肺癌样品中肺癌组织与癌旁组织中720个miRNA的表达情况，发现约20个miRNAs表达异常。经过高内涵筛选系统进行第二轮筛选，本论文确定对miRNA-192和miRNA-375进行了深入研究。
对miRNA-192的研究发现:在肺癌A549细胞中过表达miRNA-192可抑制细胞增殖并促进细胞凋亡;通过靶点预测，视网膜母细胞瘤基因1(Retinoblastoma 1，RB1)可能是miRNA-192的靶点之一。实验结果显示，miRNA-192抑制RB13UTR报告基因活性，并下调A549细胞中RB1 mRNA及蛋白表达水平。利用小干扰RNA(siRNA)抑制RB1的表达与添加miRNA-192对A549细胞引起的表型变化相同。过表达RB1可阻断miRNA-192对A549细胞生长的影响。结果证实，RB1是miRNA-192的靶点之一。体内实验验证了miRNA-192显著抑制肺癌A549细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。
对miRNA-375的研究发现:与在正常细胞HUVEC细胞中的表达水平相比，miRNA-375在A549、H460等多株肺癌细胞中的表达显著降低。实验结果表明:miRNA-375将A549细胞阻滞在G1期，从而抑制A549细胞的增殖;miR-375诱导H460细胞发生凋亡。我们利用生物信息学等多种方法对miRNA-375的作用靶点进行了预测，实验也发现miRNA-375可抑制数个候选基因3UTR报告基因的活性。但是，miRNA-375在肺癌细胞中的功能靶点与作用途径有待于进一步研究确定。
综上所述，我们的研究结果提示:miRNA-192和miRNA-375是十分重要的抑癌基因，其异常表达可能与肺癌发生有密切的联系。
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