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研究背景：肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)是世界第五大恶性肿瘤,全世界肝癌患者中我国约占55%,男性发病率是女性的4-5倍。在我国农村居肿瘤相关死亡率第一位,城市肿瘤相关死亡率仅次于肺癌,居第二位。手术切除和肝移植是治愈HCC的两大手段,但长期生存取决于诊断时的分期。早期HCC患者的1、3、5年生存率分别为93.5%、70.1%和59.1%；中期HCC患者的1、3、5年生存率分别为65.3%、30.5%和23.5%；晚期HCC患者的半年、1年生存率分别为52.5%、14.7%。HCC的治疗难点在于：①大多数患者具有乙肝和肝硬化背景,常合并肝功能障碍；②发病年龄相对较低,起病隐匿,进展迅速,容易发生肝内播散和远处转移；③仅部分患者可接受手术治疗(少于20%),根治性切除率更低；④手术后复发率高。与过去30年纵向比较,由于诊断水平的提高,早期HCC确诊率增高,手术切除比例增高,非手术疗法的进步,我国HCC的生存期及生存率已获得了显著改善。但与乳腺癌、结直肠癌等横向比较,HCC总生存率低、生存期短,主要原因归结为：对于其发生、发展机制了解不够,无法进行针对性治疗,因而探寻HCC的分子机制是目前迫切的需要。HCC发生、发展和转移与细胞信号传导通路和新生血管增生异常等密切相关,其中存在多个关键性环节,是进行分子靶向治疗的理论基础和重要潜在靶点。近年来,分子靶向药物治疗HCC已成为研究热点。索拉非尼是一种口服多靶点、多激酶抑制剂,抑制肿瘤血管生成和肿瘤增殖。基于两项随机、双盲、平行对照的多中心Ⅲ期临床研究结果(SHARP和Oriental研究),索拉非尼能显著延长晚期HCC患者的总生存期和至疾病进展时间,2008年欧洲EMEA、美国FDA和我国SFDA已相继批准索拉非尼用于不能手术切除和远处转移的晚期HCC的标准治疗选择之一。Syndecan-1是硫酸类肝素蛋白聚糖家族(Heparin-sulphate proteoglycans, HSPGs)的syndecans亚家族成员之一,表达于多种类型细胞表面,通过与肿瘤微环境(Tumor microenvironment)中间质细胞、细胞外基质成分(Extracellular matrix, ECM)、生物活性分子等相互作用,影响肿瘤细胞增殖、粘附、迁移及血管生成等过程。Syndecan-1在不同肿瘤表达水平及临床病理意义不同。有研究表明,syndecan-1表达下降与肿瘤恶性表型有关,细胞表面syndecan-1表达下降使细胞粘附减弱,转移潜力增强。然而,尽管胰腺癌及多发性骨髓瘤肿瘤细胞表面表达syndecan-1,亦容易发生远处转移。目前关于syndecan-1与HCC相关性研究,主要从syndecan-1在HCC组织表达的临床病理意义方面阐述,可能机制报道甚少。数个研究结果显示syndecan-1表达缺失或下降与HCC分化不良、侵袭转移等恶性表型有关。但是,也有研究显示syndecan-1高表达于HCC低分化癌组织中,与上述研究的结论相互矛盾。研究目的：了解syndecan-1在HCC原发灶、癌旁肝组织及肝内转移灶的表达强度,探讨syndecan-1在HCC原发灶表达强度与临床病理因素的相关性,及其与肿瘤转移,增殖和血管生成的关系。研究方法：1.应用免疫组织化学(Immunohistochemistry, IHC)方法检测syndecan-1在HCC原发灶、癌旁肝组织和肝内转移灶的表达,血管内皮生长因子(Vascularendothelial growth factor, VEGF)、CD34-微血管密度(Microvessel density，MVD)在原发灶和肝内转移灶的表达及Ki-67在原发灶的表达。(1)比较30例HCC原发灶、癌旁肝组织及肝内转移灶中syndecan-1表达强度的差异；(2)分析30例HCC原发灶中syndecan-1表达强度与HCC临床病理因素(包括临床分期、肿瘤大小、分级、血清AFP水平、Child-Pugh肝功能分级、是否伴有肝硬化及癌栓)之间的关系；(3)分析30例HCC原发灶中syndecan-1表达强度与Ki-67增殖指数之间的关系；(4)比较30例HCC原发灶及肝内转移灶中VEGF表达强度及CD34-MVD的差异；(5)分析30例HCC原发灶中syndecan-1表达强度与VEGF表达强度及CD34-MVD之间的关系；(6)分析30例HCC肝内转移灶中syndecan-1表达强度与VEGF表达强度及CD34-MVD之间的关系。2.统计学方法：应用SPSS 13.0软件进行统计学处理,P<0.05则认为具有显著性差异；原发灶、癌旁肝组织及肝内转移灶中syndecan-1表达强度比较采用Kruska-Wallis检验；syndecan-1表达与HCC临床病理因素的关系用Wilcoxon检验(2组比较)或Kruska-Wallis检验(3组比较)；VEGF和CD34-MVD在原发灶与肝内转移灶的比较分别采用Wilcoxon检验和两样本t检验；syndecan-1与Ki-67指数、VEGF及CD34-MVD的相关性采用Spearman相关性检验。研究结果：1. Syndecan-1在HCC原发灶中表达增强,在癌旁肝组织中低表达,在肝内转移灶的表达强度显著低于原发灶。HCC原发灶中syndecan-1高、中、低、无表达者例数分别为9、15、4、2,癌旁肝组织中syndecan-1高、中、低、无表达者例数分别为1、15、14、0,肝内转移灶中syndecan-1高、中、低、无表达者例数分别为0、6、17、7。三组间syndecan-1表达强度有显著性差异(χ2=25.62, P< 0.001)。2.原发灶中syndecan-1表达强度与HCC临床分期、肿瘤大小、分级、血清AFP水平、Child-Pugh分级、是否伴有肝硬化及癌栓均无关。Syndecan-1在HCC原发灶中表达强度在临床分期(P=0.143)、肿瘤大小(P=0.980)、分级(P=0.102)、血清AFP水平(P=0.432)、Child-Pugh分级(P=0.822)、是否伴有肝硬化及癌栓间(P分别为0.573和O.137)均无显著性差异。3.HCC原发灶中syndecan-1表达强度与Ki-67增殖指数呈显著正相关。HCC原发灶中syndecan-1高、中、低、无表达者的Ki-67增殖指数分别为22.8±20.2%、21.6±21.5%、4.8±8.7%和0.3±0.4%,syndecan-1表达强度与Ki-67增殖指数呈显著正相关(r=0.386,P=0.035)。4. VEGF表达及CD34-MVD在HCC原发灶及肝内转移灶中无统计学差异。(1)HCC原发灶中VEGF高、中、低表达例数分别为15、10、5,肝内转移灶中高、中、低表达例数分别为13、15、2,两组间无统计学差异(W=912.5,P=0.968)。(2)HCC原发灶及肝内转移灶中CD34-MVD分别为308.3-150.0／mm2、329.1±155.4／mm2,两者间无统计学差异(t=-0.528,P=0.600)。5.HCC原发灶中syndecan-1表达强度与VEGF表达强度、CD34-MVD无统计学相关,但与CD34-MVD之间存在正相关趋势。HCC原发灶中syndecan-1表达强度与VEGF表达强度无统计学相关性(r=0.319,P=0.086)；原发灶syndecan-1表达强度与CD34-MVD之间无统计学相关性,但存在正相关趋势,在原发灶syndecan-1高、中、低、无表达者的CD34-MVD分别为329.3±140.2/mm2、319.7±176.0/mm2、206.3±66.0/mm2和(?)331.9±8.9/mm2(r= 0.200, P=0.290)。6.HCC肝内转移灶中syndecan-1表达强度与VEGF表达强度无统计学相关性,与CD34-MVD之间呈显著正相关关系。HCC肝内转移灶中syndecan-1表达强度与VEGF表达强度无统计学相关性(r=0.124 P=0.513)；肝内转移灶syndecan-1表达强度与CD34-MVD之间呈显著正相关关系,syndecan-1中、低、无表达者的CD34-MVD分别为425.3±121.5／mm2、326.2±170.7/mm2、253.7±103.6/mm2 (r=0.370, P=0.044)。研究结论：1. Syndecan-1在HCC肝内转移灶的表达强度显著低于原发灶及癌旁组织,提示syndecan-1表达下降或缺失可能与HCC转移有关。胞膜syndecan-1表达下降或缺失的肿瘤细胞,由于其与基质之间粘附减弱,自由度增大,导致其侵袭转移潜力增强,易于进入循环,形成肝内外转移瘤。2.HCC原发灶中syndecan-1表达强度与肿瘤细胞增殖指数呈正相关,syndecan-1可能作为多种生长因子的共受体,刺激肿瘤生长。3.HCC组织中syndecan-1表达强度与肿瘤新生血管呈正相关,提示syndecan-1可能通过易化促血管生成因子相应受体的二聚化过程,增强促血管生成效应,促进肿瘤生长、转移。4.HCC组织中syndecan-1表达可能影响肿瘤转移、增殖和血管生成。HCC肿瘤细胞的转移可能需要syndecan-1从膜表面脱落、缺失,当肿瘤细胞发生转移,定植于转移部位后,syndecan-1重新在膜表面表达,再次促进肿瘤生长、血管生成。提示syndecan-1在HCC生长和转移中的特殊作用可能为HCC有效治疗策略提供新思路。