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为了阐明pol β基因在胃粘膜恶性演变过程中的生物学作用,为其基因预防和诊治找到理论依据,该课题对人类原发性胃癌及癌前病变不同阶段的胃组织中po1 β进行了系统的分析,并对其与其它肿瘤相关基因的关系进行了研究.在此基础上,探讨了具有抗癌潜能的大蒜素对po1 β基因的影响及其与某些转导通路上的重要基因之间的关系.首先,我们采用RT-PCR、DHPLC及DNA测序等方法分别检测了13种具有代表性的胃癌细胞系以及104例处于不同病变阶段的胃粘膜组织标本.同时,利用RT-PCR、Western Blot等方法检测胃癌发生发展过程不同阶段胃粘膜病变中pol β的表达情况,采用组织阵列进行免疫组化及原位杂交验证;并选择了pol β基因有明显差异的组织标本利用cDNA芯片比较了它们在多种转导通路中某些重要基因的改变.在此基础上,用大蒜素处理BGC823和MGC803,以RT-PCR和Western Blot方法检测pol β基因的表达情况,并利用cDNA芯片比较了两种细胞系在处理前后一些转导通路中的基因差异.结果显示:13个人类胃癌细胞系中有6个存在三种不同形式的pol β基因点突变;104例组织中23例存在9种不同形式的点突变,其中35﹪原发性肿瘤组织(14/40),30﹪的Dys(3/10),28.6﹪的IM(4/14),10.5﹪的CAG(2/19),在SG以及配对的正常粘膜中未发现任何突变.频率最高的点突变是核苷酸889位的T变C,导致其编码的259位氨基酸由亮氨酸变为丝氨酸.该突变既存在于细胞系也存在于原发性胃癌及癌前病变,包括4个胃癌细胞系及11例组织标本(7例GC组织、2例D)ys、2例IM);在13个胃癌细胞系中,MGC803,SGC7901和PAMC82的pol β表达水平明显高于其它的细胞系;33对被检测的原发性GC中有30例pol β表达较它们配对的正常组织明显增高;pol β表达量从SG、CAG、IM、Dys到GC依次增高;原发性胃癌中pol β基因异常与孕激素受体(PR)表达水平呈正相关;大蒜素对人胃癌细胞系BGC823和MGC803的pol β表达水平有明显下调作用;大蒜素下调胃癌细胞系BGC823中pol β的表达伴有p21、IkB、Bax和Bcl-xl的mRNA表达水平明显增加和Selectin E明显下降.结果提示,pol β基因突变和过量表达可能是胃黏膜的恶性演变过程中的一个重要的早期分子事件;大蒜素可能以pol β为分子靶点通过调节细胞的增殖与分化的平衡实现降低胃癌风险的作用.本研究为阐明胃癌发病的分子机理及基因预防和诊治提供了重要的线索.