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小菜蛾是发生在十字花科蔬菜上最具破坏性的世界性害虫之一,发生代数多,极易对化学农药产生抗性。小菜蛾颗粒体病毒(Plutella xylostella granulovirus, PlxyGV)是小菜蛾的天然控制因子。其基因组全序列己于2000年发表。IAPs (inhibitor of apoptosis)是一类抑制细胞凋亡蛋白家族的总称。它们在结构上都含有BIR. RING结构域。杆状病毒感染常会引起宿主细胞的免疫反应,使细胞凋亡。抑制细胞凋亡可以延长细胞的存活时间,从而可以维持病毒的复制增殖和传播。根据PlxyGV基因组序列分析,PlxyGV中含有一个iap同源基因(nt80675-81520)。序列比对分析显示,PlxyGV iap基因预期编码产物与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus, AcMNPV)IAPs以及苹果小卷叶蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella granulovirus, CpGV)IAP3序列相似度较高。功能互补性试验己证实CpGV IAP3具有抗细胞凋亡的功能,而PlxyGV IAP的功能未知。本研究采用瞬时表达的方法研究PlxyGV IAP的功能。首先,用PlxyGV iap瞬时表达质粒转染草地贪夜蛾细胞系(Spodoptera frugiperda,Sf9);再在培养液中加入放线菌酮D或接种AcMNPV p35缺失突变体(AcMNPV△P35)感染液；通过光镜观察,流式细胞仪检测和DNA梯度电泳图谱等方法检测细胞的凋亡情况。实验结果显示,在接种AcMNPV△P35的情况下,被PlxyGV iap转染的Sf9细胞的凋亡率显著低于未被PlxyGV iap转染的细胞；在用放线菌酮D处理的情况下,被PlxyGV iap转染的Sf9细胞的凋亡率与未被PlxyGV iap转染的细胞相比无显著差异。由此推断,在Sf9细胞中PlxyGV IAP可以有效地抑制由AcMNPV△P35诱导的细胞凋亡；而不能有效抑制放线菌酮D诱导的细胞凋亡。为了进一步确定PlxyGV IAP抑制细胞凋亡作用的功能域,用PCR方法对PlxyGV iap基因做渐进截短突变,将截短突变体用于对AcMNPV△P35诱导的细胞凋亡抑制实验。实验结果显示,PlxyGV IAP的BIR结构域或RING结构域的破坏,都会导致IAP抗细胞凋亡功能的丧失。