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(1)沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)属落叶灌木或小乔木,是胡颓子科(Elaeagnaceae)植物。沙棘的地理分布广,现有6个种类和6类亚种,总面积达到133万公顷,其特性是耐旱、耐寒、抗风沙。由于沙棘生长的特殊性,研究沙棘的生物活性也越来越广泛,其中沙棘叶、沙棘果、沙棘籽均有表现出活性特征。本文中的沙棘果产自吉林省蛟河市,通过优化闪式提取沙棘多糖工艺、沙棘多糖分离纯化、沙棘多糖结构鉴定和沙棘多糖的抗氧化活性进行研究,为沙棘多糖的研究奠定了理论基础,初步结论如下:首先确定闪式提取沙棘多糖四个单因素,分别为转速、提取时间、提取温度和液料比,通过响应面Box-Behnken试验设计同时对数据处理并进行回归分析,得出了闪式提取沙棘多糖的主要因素为转速、提取时间、提取温度和液料比,并根据软件对这四个主要因素进行了优化。结果闪式提取沙棘多糖的最佳工艺条件为:转速5000r/min,提取时间15s,提取温度90℃,液料比38mL/g。在此条件下,多糖的实际提取率为15.28%,与该响应面模型预测出的15.47%的相对误差值为1.2%。通过查阅文献将热水回流提取法、微波提取法、超声波提取法与闪式提取沙棘多糖的工艺进行对比实验。提取率分别为13.42%、8.93%、10.24%和15.28%。其中闪式提取法用时最短,提取率高,环保高效,具有应用价值。(2)响应面优化闪式提取沙棘多糖工艺得到的粗多糖,利用DEAE纯化后对其进行分级醇沉的手段分离出两个组分,最后采用葡聚糖凝胶G-150对两个组分进一步分离纯化制备单一组分的沙棘多糖,实验获得HRP-1和HRP-2两个组分。(3)紫外分光光度计全波长扫描发现HRP-1和HRP-2均无蛋白质和核酸的明显吸收波长,红外光谱图分析,两个组分的多糖均出现了多糖的明显特征吸收峰,在1743 cm-1附近出现的特征吸收峰说明有糖醛酸存在。其中两个组分都含有甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖,HRP-1含量最高的是半乳糖醛酸,所占摩尔比为97.64%,HRP-2中含量最大的是阿拉伯糖,所占摩尔比为31.80%。同时实验结果还发现HRP-2中含有岩藻糖,所占摩尔比为2.2%。分子量分别为380.59KDa和288.24KDa。(4)沙棘多糖的两个组分的抗氧化活性研究采用三个体系,分别为清除羟基自由基、清除ABTS自由基和清除DPPH自由基的测定。沙棘多糖经过分离纯化后得到的两个组分HRP-1和HRP-2均具有较好的抗氧化活性,在不同的抗氧化体系中两个组分表现出的抗氧化能力不同,在三个体系中HRP-1组分的IC50分别是1.01±0.04mg/mL、0.94±0.07mg/mL、0.29±0.05mg/mL,HRP-2组分的IC50分别为0.59±0.03mg/mL、0.99±0.09mg/mL、0.30±0.02mg/mL。通过数据结果发现,沙棘多糖的两个组分抗氧化活性良好,说明闪式提取的沙棘多糖具有良好的抗氧化活性。(5)对RAW264.7细胞活性的实验中发现,在适宜的浓度范围内,HRP-2具有较好的免疫调节活性,可作为开发沙棘多糖的药物和功能性食品中潜在的免疫调节剂。