【摘 要】
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病原菌的快速鉴定对于患者治疗至关重要.通过查询公共数据库和测序,建立了常见病原菌23S rRNA基因5末端约350-400个碱基序列的序列库.以这些序列为基础,用DNASTARMEGALIGN软
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病原菌的快速鉴定对于患者治疗至关重要.通过查询公共数据库和测序,建立了常见病原菌23S rRNA基因5末端约350-400个碱基序列的序列库.以这些序列为基础,用DNASTARMEGALIGN软件构建系统发生树.分析结果与现有的细菌分类系统吻合,与基于16S rRNA序列的系统发生分析基本相同.以细菌的23 s rRNA基因可变区为靶序列,设计针对细菌种类,种属,革蓝氏阴性细菌,所有细菌的特异性探针,固定在尼龙膜基质形成寡核苷酸微阵列(基因芯片)检测细菌.用一对通用PCR引物扩增细菌的靶序列并标记地高辛,然后和芯片进行反向杂交,杂交结果用ELISA法显示.从所显示的杂交点判断样品中的细菌种类.总共检测167例,有2例为PCR阴性,一例为复数菌,8例鉴定失败,成功率为93﹪.这一方法可以快速,准确地鉴定细菌,只要扩展探针阵列,无需增加实验的复杂度和费用就可以施展微阵列的检测范围.
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