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目的:探讨大黄蛰虫丸促进血管新生的作用,从而为动脉硬化闭塞症的治疗提供有益的参考,并且为大黄蛰虫丸的疗效提供实验依据。材料与方法:材料:清洁级3.0~4.0月龄的健康纯种Wistar雄性大白鼠50只,体质量(180±20)g,由辽宁中医药大学实验动物中心提供。高脂饲料组成:62.8%基础饲料+150g/L胆固醇+20%猪油+2g/L丙基硫氧嘧啶+20g/L胆酸钠。酶联免疫吸附(Enzyme-linkedimmunosorbent,ELISA)双抗体夹心法检测试剂盒均购自上海越研生物技术有限公司,转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β,批号AE99292Ra),血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF,批号AE98006Ra)。兔抗鼠CD31抗体购自武汉博士德生物公司。方法:清洁饲料适应性喂养1周后,以内膜损伤加高脂饲料喂养的方法建立ASO动物模型50只。模型大鼠按照随机数字表法分为4组:模型对照组,大黄蛰虫丸高、中、低浓度组,每组10只。另取10只大鼠做为正常对照组。于实验终点用激光多普勒血流仪记录每只大鼠左后肢血流灌注值。在每组实验的终点,将组织标本切片,行CD31(FITC标记)免疫组织化学染色,计数成簇的CD31+细胞的平均值,用于反映新生毛细血管的密度。ELISA双抗体夹心法检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF-β)的含量。结果:1.与正常对照组相比,造模后各组大鼠的左后肢血流灌注均有所下降。血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平明显升高,高密度脂蛋白水平明显降低,差异均有极显著意义(P<0.01)。2.与模型对照组相比,大黄蛰虫丸高、中、低浓度组血流灌注显著改善(P<0.01)。血清胆固醇、甘油三酯水平明显下降,差异均有极显著意义(P<0.01)。3.造模后与正常对照组相比,各组大鼠血液中VEGF、TGF-β水平升高,差异均有极显著意义(P<0.01);应用大黄蛰虫丸治疗后,各组血清中的VEGF、TGF-β水平均有改善,差异均有极显著意义(P<0.01),以高浓度组变化最为明显。结论:(1)大黄蛰虫丸可明显改善大鼠下肢缺血的症状且高浓度组的治疗效果最显著。(2)血管内皮细胞分泌功能的异常是ASO易损血液的重要物质基础,VEGF、TGF-β水平的变化与ASO的病情进展密切相关。(3)大黄蛰虫丸能够通过调节血管内皮细胞的分泌功能改善肢体的血流灌注和缺血状态,调节VEGF、TGF-β在血液中的水平,对于实验性ASO具有较好的治疗作用。