【摘 要】
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目的:1.观察加味二妙颗粒对HR-HPV持续感染患者的临床疗效及治疗前后阴道微生态的变化情况,为加味二妙颗粒在临床推广提供循证依据,为防治HR-HPV持续感染和宫颈癌前病变提供中医新思路;2.进一步分析HR-HPV持续感染患者阴道灌洗液中的菌群及其代谢产物,研究探讨HR-HPV持续感染与阴道菌群及其代谢产物之间的关系,探究HR-HPV持续感染的发病机制,为扩大加味二妙颗粒临床应用范围提供理论依据。
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目的:1.观察加味二妙颗粒对HR-HPV持续感染患者的临床疗效及治疗前后阴道微生态的变化情况,为加味二妙颗粒在临床推广提供循证依据,为防治HR-HPV持续感染和宫颈癌前病变提供中医新思路;2.进一步分析HR-HPV持续感染患者阴道灌洗液中的菌群及其代谢产物,研究探讨HR-HPV持续感染与阴道菌群及其代谢产物之间的关系,探究HR-HPV持续感染的发病机制,为扩大加味二妙颗粒临床应用范围提供理论依据。方法:1.选取2019年11月至2019年12月至江苏省中医院妇科门诊的HR-HPV感染,且符合湿热下注证的中医证型的患者,共80例,随机数字法将其分为治疗组（加味二妙颗粒治疗）、对照组各40例。治疗组予加味二妙颗粒治疗,对照组予随访观察,于6个月后复查白带常规及HPV、TCT评价临床疗效和阴道微生态情况;2.选取2020年05月至2020年07月于江苏省中医院妇科就诊因HR-HPV感染和（或）TCT示ASCUS及以上病变,要求行阴道镜及宫颈组织活检的女性共156名,并依据宫颈活检组织的病理结果,将患者作如下分组:未见上皮内细胞病变组（NILM组,78例）、宫颈低级别鳞状上皮内病变组（LSIL组,52例）、宫颈高级别鳞状上皮内病变组（HSIL组,26例）,行白带常规检测,采集阴道灌洗液行16s rRNA基因测序和代谢组学分析。结果:1.（1）对两组临床疗效进行比较,治疗组和对照组转阴例数为33例、24例,总有效率分别为82.5%、60%,组间差异有统计学意义（P<0.05）,加味二妙颗粒清除HR-HPV感染疗效确切;（2）对两组阴道微生态变化进行组间比较,治疗组阴道清洁度异常检出率、H202阳性表达率、白细胞酯酶阳性表达率、唾液酸苷酶阳性表达率明显低于对照组,经χ 2检验,χ2分别为5.165、6.765、5.591,差异均有统计学意义（P<0.05）;阴道清洁度、H2O2、白细胞酯酶、唾液酸苷酶是影响HR-HPV转阴的相关因素,相关系数分别为0.254、0.453、0.391、0.330,经检验差异均具有统计学意义（P<0.05）。（3）治疗组患者用药期间无不良反应发生,血常规及肝肾功能未见明显异常,加味二妙颗粒具有安全性。2.（1）HR-HPV感染患者的阴道菌群种类及多样性随着SIL发生发展而降低,患者阴道微环境的清洁度随之下降,且菌群失衡可能与致病厌氧菌增加有关,奇异菌属、纤毛菌属以及其他杂菌的丰度上升,链球菌属的丰度下降。（2）三组阴道灌洗液共检测出164种已知代谢产物。随着宫颈病变程度加深,宫颈阴道微环境中的氨基酸、嘌呤、尿酸等代谢产物有显著变化趋势。（3）NILM组与HSIL组、LSIL组与HSIL组均观察到了明显的分离趋势,这表明HSIL的患者与其他患者的分泌物代谢模式有着显著差异。且影响SIL发生的代谢途径的通路主要有氨酰基-tRNA生物合成通路、苯丙氨酸和酪氨酸和色氨酸通路、丙氨酸和天冬氨酸和谷氨酸代谢通路。（4）多种代谢产物与阴道菌群有显著关联性。牛磺酸与魏斯氏菌、卟啉单胞菌、理研菌科RC9肠道群呈正相关性,与棒杆菌属、Rhodococcus菌、青枯菌呈负相关性。羟胺、羟基脲等羟基类产物与多种阴道菌群成显著正相关,但与乳酸杆菌呈负相关。甘露醇、甘油、鸟嘌呤、腺嘌呤等则正好相反。（5）宫颈病变最初进展会导致宫颈-阴道环境中消耗大量的氨基酸,嘌呤等。随着疾病程度加重,氨基酸,嘌呤和其他代谢产物可能产生代偿性上调,并参与宫颈和阴道上皮细胞的免疫防御功能。结论:（1）阴道灌洗液易于获得且无创,有作为辅助判断HPV发病机制及SIL进展的诊断手段的潜力,对预防宫颈癌的发生有促进作用。（2）加味二妙颗粒对湿热下注型HR-HPV持续感染患者的临床疗效显著,同时还可显著改善患者阴道微生态,药后复查安全性指标无异常,安全有效,值得进一步在临床中推广应用。（3）HPV感染女性的阴道菌群仍由乳酸杆菌和加德纳菌组成,但随SIL进展,灌洗液中所含的微生物的丰度和多样性也随之变化。宫颈阴道菌群通过调节氨基酸、嘌呤、尿酸等代谢产物的合成与分解,可能在激活炎症及免疫系统上起重要作用。
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