大鼠脑内星形胶质细胞对渗透压改变的反应及其和神经元相互关系的形态学研究

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hanminaaaa
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传统观点认为,星形胶质细胞(AST)对神经元起支持、营养和保护功能,但随着研究技术的不断进步,越来越多的证据表明,AST并非惰性细胞,而是与周围神经元之间存在双向通讯,并能主动调控神经元的活动。 目的:本研究试图从整体水平共同观察神经元和AST对高渗透压刺激的反应,探讨神经胶质细胞—神经元复合体在渗透压调控过程中的作用。 方法:通过给予大鼠饮用3%氯化钠或提高培养基渗透压浓度的方法复制高渗刺激模型,主要采用抗Fos、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和酪氨酸羟化酶(TH)(或加压素—VP)免疫组织化学多重染色、免疫电镜、WGA-HRP束路追踪结合免疫组织化学多重染色、细胞培养等实验方法,系统观察了中枢参与渗透压反射的调控部位、下丘脑视上核(SON)神经元—AST超微结构的变化、延髓内脏带(MVZ)和SON及下丘脑室旁核(PVN)之间往返投射通路和神经元的性质及其与AST的关系、培养神经元和AST内钙波的变化。 结果:(1)MVZ、臂旁核、蓝斑、PVN、SON和穹窿下器等部位Fos阳性细胞明显增多。脑内GFAP阳性结构也明显增多,其分布与Fos阳性细胞分布基本一致,表现为胞体肥大、突起粗长;AST紧密包绕在神经元周围形成神经元-AST复合体(N-ASC);在MVZ、PVN和SON三重免疫组化染色切片上可见到Fos+/TH+/GFAP+ 第四军医大学博士学位论文 和 Fos+/VP+/GFAP+三重标记 \-ASC;(2)免疫电镜下 SON内星型胶质细胞突起与 神经元树突或轴突之间接触部位出现增厚的膜结构一电于致密区(EDAS),高渗 刺激后数量明显增多:(3)将们个mP注入大鼠一侧n卜、卜卜或孤束核(wS), 分别在延髓内脏带(MVZ)、SO\和 PVN内出现 FoS/HRP/TH、Fos/HRP八P三重标记 神经元和 GFAP阳性标记 AST形成的 N-ASC;(4)高渗刺激使培养神经元和 AST 内钙水平先升高后降低,最后维持在比高渗刺激前稍高的静息钙水平上。AST钙 水平达到峰值的速度略快于神经元。 结论:参与大鼠高渗性渗透压调节的中枢主要位于 MVZ、SON和 PVN等 核团,神经元和AST以N-ASC的形式共同参与渗透压调节反应,体内存在MVZ 和SON或PVN之间往返的渗透压调节通路。
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