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传统观点认为,星形胶质细胞(AST)对神经元起支持、营养和保护功能,但随着研究技术的不断进步,越来越多的证据表明,AST并非惰性细胞,而是与周围神经元之间存在双向通讯,并能主动调控神经元的活动。 目的:本研究试图从整体水平共同观察神经元和AST对高渗透压刺激的反应,探讨神经胶质细胞—神经元复合体在渗透压调控过程中的作用。 方法:通过给予大鼠饮用3%氯化钠或提高培养基渗透压浓度的方法复制高渗刺激模型,主要采用抗Fos、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和酪氨酸羟化酶(TH)(或加压素—VP)免疫组织化学多重染色、免疫电镜、WGA-HRP束路追踪结合免疫组织化学多重染色、细胞培养等实验方法,系统观察了中枢参与渗透压反射的调控部位、下丘脑视上核(SON)神经元—AST超微结构的变化、延髓内脏带(MVZ)和SON及下丘脑室旁核(PVN)之间往返投射通路和神经元的性质及其与AST的关系、培养神经元和AST内钙波的变化。 结果:(1)MVZ、臂旁核、蓝斑、PVN、SON和穹窿下器等部位Fos阳性细胞明显增多。脑内GFAP阳性结构也明显增多,其分布与Fos阳性细胞分布基本一致,表现为胞体肥大、突起粗长;AST紧密包绕在神经元周围形成神经元-AST复合体(N-ASC);在MVZ、PVN和SON三重免疫组化染色切片上可见到Fos+/TH+/GFAP+ 第四军医大学博士学位论文 和 Fos+/VP+/GFAP+三重标记 \-ASC;(2)免疫电镜下 SON内星型胶质细胞突起与 神经元树突或轴突之间接触部位出现增厚的膜结构一电于致密区(EDAS),高渗 刺激后数量明显增多:(3)将们个mP注入大鼠一侧n卜、卜卜或孤束核(wS), 分别在延髓内脏带(MVZ)、SO\和 PVN内出现 FoS/HRP/TH、Fos/HRP八P三重标记 神经元和 GFAP阳性标记 AST形成的 N-ASC;(4)高渗刺激使培养神经元和 AST 内钙水平先升高后降低,最后维持在比高渗刺激前稍高的静息钙水平上。AST钙 水平达到峰值的速度略快于神经元。 结论:参与大鼠高渗性渗透压调节的中枢主要位于 MVZ、SON和 PVN等 核团,神经元和AST以N-ASC的形式共同参与渗透压调节反应,体内存在MVZ 和SON或PVN之间往返的渗透压调节通路。