论文部分内容阅读
本研究分别用发根农杆菌30148,15834和ZALF三种菌株感染三倍体毛白杨叶外植体,并获得毛状根。建立三倍体毛白杨毛状根离体培养系统,在含不同激素的培养基上诱导毛状根再生植株。分别从形态特征差异、PCR检测、冠瘿碱检测三个方面对三倍体毛白杨转化植株进行了鉴定。表明Ri质粒的T-DNA已整合进再生植株中。 三倍体毛白杨的转基因植株与对照相比,91%的植株都发生了叶片皱缩,9%转化植株叶片生长正常,转化植株的叶片均在MS0具有自发根的特性。对转基因三倍体毛白杨无性系试管苗生根率、根长、根数量、茎高生长及表型变异进行研究,结果表明:转基因三倍体毛白杨植株与对照相比,转基因三倍体毛白杨明显提高了组培苗的生根率,且根系发达;78%左右转基因无性系的根数量比对照增多,且侧根发达,形成簇生根,在组培苗生长过程中表现生根能力显著提高。田间栽植幼苗在叶片形态、叶面积、叶柄长度、节间长度、苗高等方面与对照相比具有显著的差异,多数表现为叶片皱缩、叶面长宽比增加、叶面积减少、叶柄长度变短、高生长量减少等特征。筛选出生长正常的如3.07、3.28、3.63等无性系,生长变异很小。 从发根农杆菌30148转化三倍体毛白杨转化植株中,挑选了30个不同的转基因无性系测定了其主要功能叶的叶绿素含量及其光合速率。结果表明:不同转基因无性系间叶绿素含量差别较大,有两个转基因无性系的叶绿素b含量非常低,其它转基因无性系叶绿素a、叶绿素b和叶绿素（a+b）含量间呈线性相关;转基因无性系的净光合速率85%左右较对照低,并且叶绿素含量与净光合速率没有相关性,转基因无性系的净光合速率与幼苗高生长呈正相关。 通过HPLC法对转化的部分植株叶片的内源激素进行了测定,所有转化植株叶片中IAA含量均显著高于对照植株,生长表现越矮小的植株叶片中IAA含量超出对照植株越高;转化植株叶片中ABA含量也超过对照植株,但幅度不如IAA;对ZT的影响较为复杂,部分转化植株叶片的ZT含量比对照植株高,另一部分则低于对照植株:转化植株叶片中IAA/ABA比值比对照植株有不同程度的提高。