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目的：探讨黄芪多糖对哮喘小鼠CD4+T细胞中Th1/Th2/Th17/Treg细胞平衡及相关细胞因子的影响。方法：⑴将Balb/c雌性小鼠随机分为哮喘模型组、正常对照组。哮喘模型组于第0、7、14天各腹腔注射0.1ml致敏液（含OVA10ug+氢氧化铝2mg）进行致敏，第21天开始用2%OVA雾化液雾化激发，每日1次，每次45分钟，连续7天，正常对照组则用生理盐水代替OVA致敏和激发，两组小鼠均于末次激发48h后处死。使用流式液相多重蛋白定量技术（CBA）检测小鼠血清及肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ的水平，HE染色观察小鼠肺组织结构，计数BALF中白细胞总数及细胞分类，用以鉴定小鼠哮喘模型是否成功。⑵将小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、黄芪多糖（APS）治疗组，正常对照组、哮喘模型组处理方法同哮喘模型鉴定，APS低、中、高分子量治疗组致敏阶段与哮喘模型组一致，雾化阶段是在每次激发前30min对小鼠进行腹腔注射0.1ml浓度为4g/ml的黄芪多糖溶液，三组小鼠均于末次激发48h后处死，来观察APS对哮喘小鼠的治疗效果。①检测小鼠血清及BALF中IL-4、IFN-γ的水平，HE染色观察小鼠肺组织结构，计数BALF中白细胞总数及细胞分类。从动物水平观察APS对哮喘小鼠的治疗效果。②分离脾脏单个核细胞，用磁珠阳性分选CD4+T细胞并进行纯度检测后，将各组小鼠的CD4+T细胞分为对应的正常组、哮喘组、APS治疗组，置于37℃、5%二氧化碳的环境下，在含有PMA、Ionomycin、Golgistop的1640培养液中培养5h后，收集细胞进行流式检测Th1、Th2、Th17、Treg细胞的比例；另将来自哮喘组小鼠的CD4+T细胞分为哮喘组、APS组，正常组细胞仍来自正常对照组小鼠，在APS组加入不同浓度的低分子量APS溶液培养2h后，各组均加入PMA、Ionomycin，培养12h、24h、36h后收集上清-20℃冻存，CBA试剂盒检测IL-4、IFN-γ、IL-17、IL-10水平。从细胞水平上观察APS对哮喘小鼠的治疗效果。结果：⑴小鼠哮喘模型鉴定。通过小鼠行为学观察发现，哮喘组小鼠出现抓口鼻、烦躁不安、呼吸加深加快、大小便失禁、毛色暗淡等典型哮喘样症状，正常组小鼠未见上述变化；肺组织病理学观察发现，哮喘组小鼠肺组织结构紊乱，上皮损伤，气道管壁增厚，气道内分泌大量粘液，支气管及其周围血管、肺间质可见大量炎症细胞侵润，嗜酸性细胞明显增多，正常组小鼠肺组织结构清晰，气道上皮完整，无平滑肌增厚，气道及血管周围未见炎症细胞侵润；小鼠血清及BALF中IL-4、IFN-γ水平检测，IL-4水平哮喘组与正常组比较升高(P<0.05)，IFN-γ水平哮喘组与正常组比较降低(P<0.05)；BALF中白细胞总数和Eos比例检测，哮喘组与正常组比较均升高(P<0.05)。证明了小鼠哮喘模型制备成功。⑵观察APS对哮喘小鼠的治疗效果。①从动物水平观察APS对哮喘小鼠的治疗效果。小鼠行为学观察发现，APS组小鼠精神明显好转，呼吸基本正常，活动频繁，有抓耳挠鼻表现，无明显体重减轻等症状，低分子量APS组的症状最轻；肺组织病理学观察发现，APS组的肺组织结构相对规则，气道上皮完整，未见粘液栓分泌，支气管、血管周围及肺泡内炎症细胞浸润明显减少，其中低分子量APS组气道炎症最轻；小鼠血清及BALF中IL-4、IFN-γ水平检测，IL-4水平APS组与哮喘组比较降低(P<0.05)，低分子量APS组降低最明显，IFN-γ水平APS组与哮喘组比较升高(P<0.05)，低分子量APS组升高最明显；BALF中白细胞总数和Eos比例检测，APS组与哮喘组比较均降低(P<0.05)，低分子量APS组降低最明显。②从细胞水平观察APS对哮喘小鼠的治疗效果。CD4+T细胞的分选纯度提示分选前纯度为24.8%，分选后纯度为75.2%，分选前后结果有显著性差异(P<0.05)，可以用于后续细胞培养。各组小鼠脾脏Th1、Th2、Th17、Treg细胞比例检测，Th1、Treg细胞比例哮喘组与正常组比较均降低（P<0.05），APS组与哮喘组比较均升高（P<0.05），低分子量APS组升高最明显；Th2、Th17细胞比例哮喘组与正常组比较均升高（P<0.05），APS组与哮喘组比较均降低（P<0.05），低分子量APS组降低最明显；CD4+T细胞培养的上清液中细胞因子水平检测，IFN-γ、IL-10浓度哮喘组与正常组比较均降低(P<0.05)，APS组与哮喘组比较均升高(P<0.05)；IL-4、IL-17浓度哮喘组与正常组比较均升高(P<0.05)，APS组与哮喘组比较均降低(P<0.05)；关于细胞因子水平与APS浓度的关系，发现随着APS浓度升高，细胞因子变化幅度不显著（P＞0.05），提示小剂量APS即可明显影响细胞因子的分泌。结论：1. APS可抑制哮喘模型小鼠的气道炎症。2. APS通过影响CD4+T细胞分泌细胞因子，改善Th1/Th2/Th17/Treg细胞平衡，对哮喘小鼠起治疗作用。3.低分子量APS在哮喘的治疗效果上更显著。4.小剂量APS可能对哮喘气道炎症具有较好的治疗效果。